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Microfluidic technology to study phytopathogenic bacteria adhesion mechanisms

Grant number: 11/09409-3
Support Opportunities:Scholarships in Brazil - Post-Doctoral
Start date: August 01, 2011
End date: July 31, 2014
Field of knowledge:Biological Sciences - Biochemistry - Biochemistry of Microorganisms
Principal Investigator:Aline Maria da Silva
Grantee:Paulo Adriano Zaini
Host Institution: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brazil

Abstract

O fipatógeno Xylella fastidiosa (Xf), responsável por graves doenças em citros, videiras, cafeeiros e amendoeiras, entre outras plantas, apresenta, em sua superfície, diversas adesinas responsáveis pela colonização eficiente de insetos vetores e plantas hospedeiras. Trabalhos anteriores confirmaram a funcionalidade dessas proteínas, nos quais mutantes deficientes em adesinas tiveram sua capacidade de adesão reduzida. Recentemente, cepas com características fenotípicas distintas, incluindo diferenças quanto a capacidade de adesão célula a célula e ao substrato, tiveram sua sequência genômica determinada em nosso laboratório. Análises preliminares indicaram diferenças quanto à presença de adesinas, fato que motivou este projeto. Para melhor caracterizar a capacidade de adesão e motilidade dessas cepas, propomos o uso de microscopia acoplada a câmaras de microfluídica, permitindo a observação de células vivas sob condições de fluxo. Uma outra frente de investigação que iniciaremos é a caracterização bioquímica das proteínas de adesão de Xf, iniciando por MrkD. Através da produção de proteína recombinante pretendemos gerar material para iniciarmos estudos estruturais e funcionais, incluindo anticorpos policlonais que serão usados em ensaios de inibição da adesão celular em câmaras de microfluídica. Dependendo do sucesso desse objetivo outras proteínas de adesão também serão exploradas. Como um último objetivo, faremos tentativas de cultivar in vitro o patógeno Candidatus Liberibacter asiaticus, agente causador do Greening, doença devastadora nos pomares citrícolas paulistas. O avanço na compreensão deste patógeno tem sido dificultado pela incapacidade de manutenção de culturas em laboratório, um impedimento que será possivelmente eliminado pelas condições de fluxo contínuo, nas quais novos nutrientes são constantemente fornecidos e metabólitos tóxicos eliminados. (AU)

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Scientific publications (4)
(References retrieved automatically from Web of Science and SciELO through information on FAPESP grants and their corresponding numbers as mentioned in the publications by the authors)
IONESCU, MICHAEL; ZAINI, PAULO A.; BACCARI, CLELIA; TRAN, SOPHIA; DA SILVA, ALINE M.; LINDOW, STEVEN E.. Xylella fastidiosa outer membrane vesicles modulate plant colonization by blocking attachment to surfaces. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, v. 111, n. 37, p. E3910-E3918, . (11/09409-3)
UCEDA-CAMPOS, GUILLERMO; FEITOSA-JUNIOR, OSEIAS R.; SANTIAGO, CAIO R. N.; PIERRY, PAULO M.; ZAINI, PAULO A.; DE SANTANA, WESLEY O.; MARTINS, JOAQUIM; BARBOSA, DEIBS; DIGIAMPIETRI, LUCIANO A.; SETUBAL, JOAO C.; et al. Comparative Genomics of Xylella fastidiosa Explores Candidate Host-Specificity Determinants and Expands the Known Repertoire of Mobile Genetic Elements and Immunity Systems. MICROORGANISMS, v. 10, n. 5, p. 20-pg., . (11/09409-3, 08/11703-4, 21/04062-7, 09/13527-1, 11/01217-8)
FEITOSA-JUNIOR, OSEIAS R.; SOUZA, ANA PAULA S.; ZAINI, PAULO A.; BACCARI, CLELIA; IONESCU, MICHAEL; PIERRY, PAULO M.; UCEDA-CAMPOS, GUILLERMO; LABROUSSAA, FABIEN; ALMEIDA, RODRIGO P. P.; LINDOW, STEVEN E.; et al. The XadA Trimeric Autotransporter Adhesins in Xylella fastidiosa Differentially Contribute to Cell Aggregation, Biofilm Formation, Insect Transmission and Virulence to Plants. MOLECULAR PLANT-MICROBE INTERACTIONS, v. 35, n. 9, p. 10-pg., . (11/09409-3, 11/24091-0, 14/03617-1, 10/16409-7, 08/11703-4)
IONESCU, MICHAEL; ZAINI, PAULO A.; BACCARI, CLELIA; TRAN, SOPHIA; DA SILVA, ALINE M.; LINDOW, STEVEN E.. Xylella fastidiosa outer membrane vesicles modulate plant colonization by blocking attachment to surfaces. PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA, v. 111, n. 37, p. 9-pg., . (11/09409-3)