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Prospecção de fungos filamentosos visando a produção e caracterização de amilases

Beneficiário:Paula Zaghetto de Almeida
Instituição: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Maria de Lourdes Teixeira de Moraes Polizeli
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo:13/01437-3
Vigência: 01 de agosto de 2013 - 30 de abril de 2015
Assunto(s):EnzimologiaAmilasesProspecção
Resumo
O Brasil, devido a sua extensão territorial e a seus diversos biomas detém cerca de 15 a 20% da biodiversidade mundial. Essa biodiversidade vem se perdendo em ritmo acelerado. É estimado que conhecemos apenas 10% das espécies brasileiras, dentre elas os fungos, que são reconhecidos bons produtores de enzimas, como as amilases, que despertam um grande interesse biotecnológico. O amido é o principal carboidrato de reserva das plantas, e constitue grande parte da dieta das populações humanas. As enzimas que catalisam sua quebra, principalmente as alfa-amilases, beta-amilases e glicoamilases apresentam ampla aplicação nas indústrias têxteis, de papel e celulose, detergentes, panificação, farmacêutica e de bebidas. O presente trabalho visa o isolamento, seleção e identificação de novas linhagens fúngicas, otimização do processo fermentativo, purificação e caracterização enzimática, além do sequenciamento de aminoácidos de pelo menos uma amilase para a efetiva comparação dos fungos de diferentes gêneros ou espécies. (AU)

Efeitos do metotrexate subaracnóideo sobre a medula espinhal e meninges de coelhos

Beneficiário:Felipe Gilberto Valerini
Instituição: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Eliana Marisa Ganem
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Processo:11/02291-7
Vigência: 01 de maio de 2011 - 30 de novembro de 2012
Assunto(s):AnestesiologiaCoelhosMedula espinhalNeurotoxicidade
Resumo
ResumoO câncer é doença caracterizada por desvio dos mecanismos de controle que regulam asobrevida, proliferação e diferenciação de células. A cirurgia, a quimioterapia e aradioterapia são os tratamentos usualmente utilizados em pacientes ontológicos., Aquimioterapia pode ser curativa até mesmo para certas neoplasias disseminadas, tantomacroscópica como microscopicamente. Os agentes quimioterápicos como o metotrexatesão considerados antineoplásicos efetivos. Ele, que pertence à classe dos antimetabólitos,que atuam sobre o metabolismo intermediário das células em proliferação, foi introduzidona prática clínica há mais de 50 anos e apresenta ação farmacológica pelo antagonismo aoácido fólico. Por ser cada vez mais utilizado nos protocolos de tratamento de câncer, e comdoses progressivamente maiores, a ocorrência de toxicidade do tecido nervoso central pelometrotexate está aumentada. O mecanismo exato desencadeador de neurotoxicidade não foielucidado. A manifestação clínica da neurotoxicidade após sua administração pela viasubaracnóidea é a aracnoidite química e ocorre em aproximadamente 50% dos pacientes.Algum autor associara-o também a síndrome da cauda eqüina. O objetivo da pesquisa seráavaliar os efeitos que o metotrexate administrado pela via subaracnóidea determinaria sobrea medula espinal, raízes nervosas e as meninges de coelhos. Metodologia: Após aaprovação da Comissão de Ética em Experimentação Animal serão utilizados 30 coelhosadultos jovens, machos, da raça Grupo Genético de Botucatu com pesos entre 3500 e 4500g e comprimento de coluna vertebral entre 38 e 40 cm fornecidos pelo Biotério daFaculdade de Medicina de Botucatu. Os animais serão divididos em 3 grupos (G): G1punção subaracnóidea, G2 solução fisiológica e G3 metrotexate . Após anestesia venosacom xilaziana e cetamina será realizada a abordagem do espaço subaracnóideo (agulha deQuincke 22 12/2 G), no espaço intervertebral entre a premunira e a segunda vértebra sacralguiado por ultrassom. Os animais de G2 e G3 receberão as soluções correspondentes emvolume correspondente a 12 mg.m2 de superfície corpórea de metotrexate(aproximadamente 0,1 ml) ou de volume correspondente de solução fisiológica e os de G1apenas serão realizada somente a punção subaracnóidea. Este procedimento será repetidoquatro vezes em intervalos de 7 dias . As animais serão avaliados, clinicamente, quanto àsensibilidade e motricidade por 30 dias após os quais serão sacrificados por decaptação sobanestesia e retirada à porção lombar e sacral da medula espinhal para exame histológico pormicroscopia óptica e imunohistoquímica (proteína beta-amilase). (AU)

Influência dos níveis de ácido indol-3-acético na expressão dos receptores de etileno e correlação com a expressão de enzimas ligadas ao metabolismo de amido em bananas

Beneficiário:Mariana Faulin Foresto
Instituição: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Eduardo Purgatto
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos - Ciência de Alimentos
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo:09/11751-1
Vigência: 01 de março de 2010 - 29 de fevereiro de 2012
Assunto(s):Fisiologia pós-colheitaBananaAmido
Resumo
O hormônio etileno tem sido apontado como o principal responsável pelos eventos do amadurecimento em frutos. No entanto, há muito tempo observa-se que as auxinas podem atuar como reguladores do amadurecimento em conjunto com o etileno. Porém, apenas na última década este papel das auxinas vem sendo estudado com maior profundidade. Bananas tratadas com 1-MCP demonstraram que o etileno possui grande correlação com as alterações na atividade e expressão gênica das enzimas beta-amilase e DPE2, relacionadas ao metabolismo de amido. Ademais, altos níveis de auxina em bananas causam demora na degradação do amido e se relacionam à inibição da transcrição e da atividade da beta-amilase, o que indica existir uma relação entre auxina e etileno como reguladores do metabolismo de amido em bananas. A influência de AIA sobre a expressão e atividade da DPE2 ainda não foi relatada. Assim, dada a já reconhecida influência das auxinas no amadurecimento de frutos, particularmente no metabolismo de amido em bananas, mais os precedentes de literatura que indicam uma possível ligação da auxina sobre a expressão dos receptores de etileno, o presente trabalho tem como objetivo aprofundar os conhecimentos sobre a ação de AIA no amadurecimento deste fruto, verificando sua ação sobre a transcrição dos receptores de etileno e verificar sua correlação com a expressão e atividade de enzimas ligadas ao metabolismo de amido, tomando em particular a beta-amilase e a DPE2. (AU)

Produção e purificação de amilases de Zea mays para a aplicação na hidrólise de amido como alternativa à industria alcooleira

Beneficiário:José Carlos Curvelo Santana
Instituição: Faculdade de Engenharia Química (FEQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Elias Basile Tambourgi
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo:06/01508-4
Vigência: 01 de outubro de 2006 - 30 de setembro de 2008
Resumo
Este projeto objetiva produzir as enzimas alfa e beta-amilases de milho (Zea mays), purificá-las por adsorção em leito expandido sobre as resinas de trocas iônicas Amberlites e obter dados cinéticos de hidrólises de amido, em biorreatores com enzimas livres ou imobilizadas, e assim fornecer condições ótimas de emprego das mesmas para as indústrias de produção de álcool, propiciando para estas mais uma alternativa a substituição da cana-de-açúcar. Para tanto, deve-se otimizar as condições de se obtenção das enzimas durante a maltagem e a purificação.Uma coluna cromatográfica de 1x30 cm de diâmetro será usada. Será feito um estudo dos efeitos do grau de expansão do leito, do tipo de tampão e da concentração do sal de eluição sobre a recuperação das enzimas. Também se avaliará em biorreatores os parâmetros de emprego destas enzimas na forma livre e/ou imobilizada. Deseja-se encontrar as melhores condições de se produzir, purificar e usar as enzimas na hidrólise de amido. (AU)

Expressão em escherichia coli de uma beta-amilase de banana induzida durante o amadurecimento

Beneficiário:Marcelo Eiji Koike
Instituição: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:João Roberto Oliveira do Nascimento
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos - Ciência de Alimentos
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Processo:04/15768-2
Vigência: 01 de maio de 2005 - 30 de abril de 2006
Assunto(s):AmidoBananabeta-AmilaseEnzimasExpressão gênica

Recuperação das enzimas alfa e beta-amilases em sistema de adsorção em leito expandido

Beneficiário:Elias Basile Tambourgi
Instituição: Faculdade de Engenharia Química (FEQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Elias Basile Tambourgi
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química - Tecnologia Química
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo:03/06357-6
Vigência: 01 de outubro de 2003 - 31 de março de 2005
Resumo
Em atenção ao desenvolvimento de novas tecnologias é que neste trabalho propõe-se que sejam recuperadas as enzimas α e b-amilases produzidas a partir das sementes de milho (Zea mays) em sistemas de adsorção em leito expandido. Estas enzimas seriam mais uma opção aos vários processos na hidrólise do amido, principalmente pelas indústrias de álcool na produção de cerveja, em substituição sob a forma de malte de cevada (cereal este, não produzido no país) e, como em nosso país este o cultivo do milho é bastante difundido, logo teríamos um produto de baixo custo e com ótimo grau de pureza proporcionado pela recuperação em leito expandido. (AU)

Clonagem da sequancia completa de cDNA de uma beta-amilase de banana

Beneficiário:João Roberto Oliveira do Nascimento
Instituição: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:João Roberto Oliveira do Nascimento
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos - Ciência de Alimentos
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Reunião - Brasil
Processo:00/05868-9
Vigência: 08 de agosto de 2000 - 10 de agosto de 2000
Assunto(s):SacaroseAmidoAmilasesBananabeta-Amilase

Função das enzimas desramificadoras de amido durante amadurecimento da banana

Beneficiário:Jacqueline Dettmann Bierhals
Instituição: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Beatriz Rosana Cordenunsi
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos - Ciência de Alimentos
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo:99/01083-8
Vigência: 01 de maio de 1999 - 30 de abril de 2003
Resumo
A degradação do amido a açúcares solúveis é um evento característico i)a maturação de bananas, contribuindo assim para sua qualidade. Várias são as enzimas envolvidas neste processo, dentre elas destacam-se as fosforilases, alfa e beta amilases e glicosidases. Algumas alfa-glicosidases já foram evidenciadas em vegetais, que não frutas. No entanto, essas enzimas não agem sobre ligações alfa, 1-6 do amido. A r-enzima ou pululanase é uma alfa-glicosidase capaz de atuar na porção ramificada da amilopectina. Este trabalho visa estabelecer a importância das enzimas desramificadoras de amido durante o amadurecimento da banana. (AU)
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