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Resumo

Esta proposta tem como foco promover e estudar reações de haloaminação enantiosseletivas visando a síntese de aminodióis. O álcool alílico e, principalmente, seus análogos estruturais são compostos orgânicos de grande interesse à comunidade acadêmica, uma vez que permitem uma ampla variedade de transformações químicas. Na primeira etapa dessa proposta pretende-se desenvolver novas versões enantiosseletivas de reações de haloaminação intramolecular de derivados de álcoois alílicos promovidas por paládio(II)/cobre(II) e por organocatalisadores. Adicionalmente, os produtos das reações de haloaminação serão empregados como intermediários nas sínteses dos produtos naturais Esfingosina e isômeros da Jaspina. A Esfingosina e a Jaspinas serão avaliados como agentes antitumorais frente a linhagens celulares de câncer de mama (MDA-MB-231), câncer de pequenas células de pulmão (A549) e melanoma murino (B16-F12). Paralelamente aos estudos de catálise, com o auxílio da espectrometria de massas e de cálculos teóricos, pretende-se investigar e propor um ciclo-catalítico para as reações de haloaminação (via catálise metálica e orgânica), identificando através das técnicas analíticas os intermediários reativos. Almeja-se através da proposição dos ciclos-catalíticos, um melhor entendimento da causa da possível régio-, diastereo- e enantioesseletividade na formação dos produtos haloaminados. Com o desenvolvimento desta proposta espera-se cooperar com o aumento e a diversificação da produtividade científica e tecnológica da pesquisa brasileira além de se ampliar os conhecimentos de química orgânica que possam ser úteis para a comunidade científica. (AU)

Resumo

FMNL1 é expressa predominantemente em leucócitos do sangue periférico, baço e timo. Entretanto, esta proteína é altamente expressa em uma variedade de doenças malignas hematopoiéticas. Recentemente, demonstramos a participação de FMNL1 na proliferação, migração em células Namalwa (linfoma de Burkitt), o que sugere sua contribuição na leucemogênese. Em seguida, nosso grupo realizou um ensaio de microarranjo em células Namalwa, comparando a regulação gênica entre as células controles e inibidas para expressão de FMNL1 (dados preliminares). Através da análise de bioinformática, foram escolhidos 9 genes para a validação, sendo a maioria envolvida com mobilidade e metástase tumoral. Assim, nossa hipótese é que FMNL1 participe do processo de metástase e um dos nossos objetivos é avaliar as funções de FMNL1 em modelos in vitro e in vivo. FMNL1 também participa de várias funções das células hematopoiéticas normais. Dados na literatura, apontam a importância de mDia1, uma outra formina DRF, na regulação da formação de pró-plaquetas. Para compreendermos melhor as funções de FMNL1 na diferenciação megacariocítica, usamos de um modelo estabelecido de diferenciação megacariocítica com células K562 e PMA. Observamos um aumento de cerca de quinze vezes da expressão de FMNL1, após 4 dias do tratamento com PMA (dados preliminares). Assim, nossa segunda hipótese do trabalho é de que FMNL1 participe do processo de megacariopoiese. Nosso segundo objetivo é estudar a função de FMNL1 na diferenciação megacariocítica, usando tanto o modelo de linhagem celular como também células primárias CD34+. (AU)

Resumo

Anoikis é uma morte celular programada induzida pelo desprendimento de células da matriz extracelular (MEC), comportando-se como um importante mecanismo na prevenção do crescimento celular independente da adesão e ligação a uma matriz inapropriada, evitando, assim, a colonização em outros tecidos.Tumores produzem várias moléculas que facilitam a sua proliferação, invasão e manutenção, especialmente os proteoglicanos. O sindecam-4, um proteoglicano de heparan sulfato, pode atuar como um co-receptor de fatores de crescimento e proteínas da MEC. Alterações na expressão de sindecam-4 foram observadas em células tumorais, indicando o seu envolvimento no câncer. Este estudo investiga o papel de sindecam-4 no processo de anoikis e na transformação celular. Células endoteliais foram submetidas a ciclos sequenciais de impedimento de adesão e linhagens distintas foram obtidas. Células endoteliais resistentes ao anoikis apresentam alterações morfológicas, alta taxa de proliferação, fraca adesão à fibronectina, laminina e colágeno IV e desregulação do ciclo celular, tornando-se menos dependente de fatores de crescimento contidos no soro. Além disso, as linhagens celulares resistentes ao anoikis apresentam um elevado potencial invasivo e uma baixa taxa de apoptose. Isto é acompanhado por um aumento nos níveis de heparam e condroitim sulfato, bem como por alterações na expressão do sindecam-4 e da heparanase. (AU)

Resumo

O interesse crescente no estudo da função do tecido adiposo se deve não apenas à preocupação com a obesidade e suas conseqüências metabólicas, mas também pelo reconhecimento de que os adipócitos integram uma larga gama de processos homeostáticos. Apesar de serem muitos os trabalhos que mostram os efeitos de ácidos graxos (AG) sobre o metabolismo sistêmico e o consenso de que o alto consumo de AG saturados está associado com riscos cardiovasculares e resistência à insulina, ainda é incipiente o conhecimento sobre o efeito local/tecidual de diferentes AG (saturados e insaturados) com ação anti ou pró-inflamatória. Uma melhor compreensão acerca dos efeitos e dos mecanismos envolvidos na ação destes AG em adipócitos terá impacto direto na elucidação de questões relacionadas à obesidade e doenças associadas, bem como no desenvolvimento de novas terapias que tenham como alvo vias intracelulares localizadas em adipócitos. Este projeto tem como objetivo determinar o efeito de diferentes AG sobre a adipogênese e as repercussões da ação destes sobre a funcionalidade dos adipócitos, com ênfase na diferença regional dos diferentes coxins adiposos (subcutâneo e visceral). A adipogênese será avaliada por estudo de diferenciação de pré-adipócitos da linhagem celular 3T3-L1, seguido de análise da expressão de fatores transcricionais adipogênicos e do conteúdo lipídico. A funcionalidade dos adipócitos, por estudo da função secretória e metabólica destas mesmas células (recém-diferenciadas), sendo a resposta secretória avaliada pela expressão de adipocinas e proteínas (inflamatórias e da via de sinalização da insulina) tais como a leptina, adiponectina, resistina, PAI-1, IL-6, MCP-1, IL-10, IL-1beta, e TNF-alfa; IRS-1, AKT, IRbeta e GLUT4; e a resposta metabólica, pelos testes de captação de glicose, lipogênese, oxidação de AG a CO2 e lipólise pelos adipócitos. Estes estudos serão também investigados em cultura primária de adipócitos extraídos de coxim adiposo visceral e subcutâneo de camundongos. Os AG que serão investigados incluem AG saturados (ácido palmítico [PA, C16:0]), mono insaturados (ácido palmitoleico [PE, C16:1 n-7 e PE, C16:1 n-9]) e , e poli insaturados (ácido docosa-hexaenoico [DHA, C22:6 n-3] e ácido eicosapentaenoico [EPA, C20:5 n-3]). (AU)

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