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Caracterização do perfil transcricional na interação Moniliophthora perniciosa x Solanum lycopersicum

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Antonio Vargas de Oliveira Figueira
Supervisor no Exterior: Piotr Andrzej Mieczkowski
Local de pesquisa: University of North Carolina at Chapel Hill (UNC) (Estados Unidos)
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Processo:16/10524-5
Vigência: 01 de setembro de 2016 - 31 de dezembro de 2016
Assunto(s):RNA-seqExpressão gênica
Resumo
A vassoura-de-bruxa consiste em uma das principais doenças que acometem o cacaueiro (Theobroma cacao), sendo causada pelo basidiomiceto Moniliophthora perniciosa e caracterizada pelos sintomas de inchamento e indução de brotações laterais nos ramos infectados. A espécie Solanum lycopersicum, também hospedeiro do fungo M. perniciosa, apresenta uma cultivar miniatura 'Micro-Tom' ('MT'), a qual demonstrou ser um modelo genético adequado para o estudo da interação com esse patógeno, com sintomas característicos da doença. Sabe-se que o desenvolvimento dos sintomas da vassoura-de-bruxa estão relacionados à sinalização por hormônios vegetais, uma vez que o patógeno causa um desbalanço hormonal na região meristemática do hospedeiro. O modelo genético 'MT', por dispor de diversos mutantes e linhas transgênicas com alterações hormonais, representa um importante recurso para investigação do papel dos hormônios na patogênese. Também, as alterações fisiológicas típicas dos sintomas em cacaueiro podem ser melhor investigadas no sistema 'MT'. Desse modo, no presente projeto, plantas de 'MT', mutantes e transgênico com alterações na via biossintética/percepção dos hormônios auxina e citocinina serão inoculados com M. perniciosa para análise massal dos transcritos por meio do sequenciamento do RNA (RNA-seq) ao longo do tempo. Os resultados serão comparados a dados disponíveis do transcriptoma da interação M. perniciosa x T. cacao, conduzida no mesmo grupo. (AU)

Doses de fertilizante fosfatado para cultivares de batata para o mercado fresco cultivadas em solo tropical com baixa disponibilidade de fósforo

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Faculdade de Ciências Agronômicas (FCA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Rogério Peres Soratto
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Fitotecnia
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
Processo:16/11018-6
Vigência: 01 de julho de 2016 - 31 de dezembro de 2016
Assunto(s):Solanum tuberosumManejo e tratos culturaisDiagnose foliar
Resumo
O conhecimento sobre a resposta das principais cultivares de batata ao fósforo (P) é essencial para o manejo racional da adubação e para maximizar a produtividade, principalmente em solos tropicais que normalmente tem baixa disponibilidade de P. Um experimento foi conduzido para avaliar o efeito de doses de P (0, 125, 250, 500 e 1000 kg de P2O5 ha-1) sobre as concentrações foliares de nutrientes, produção de tubérculos e distribuição de tamanho, assim como a eficiência de uso do P aplicado (EUPA) nas cultivares de batata Agata e Mondial. Os resultados indicaram que não é necessário avaliar o estado nutricional de P e ajustar recomendações de adubação fosfatada baseado em cada uma das cultivares porque P adubação fosfatada resultou em aumentos semelhantes na concentração de P nas folhas de ambas as cultivares e as cultivares responderam a mesma dose de P (500 kg de P2O5 ha-1). No entanto, a cultivar Mondial apresentou uma maior EUPA e foi mais responsiva do que Agata à mesma dose de P. A concentração foliar P de 2,9 g kg-1 foi superior para 2,5 g kg-1, como o limite inferior da faixa de suficiência P para as cultivares Agata e Mondial. (AU)

Restabelecimento da tolerância à dessecação de semente germinada de Solanum lycocarpum a. St.-Hil

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Faculdade de Ciências Agronômicas (FCA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Edvaldo Aparecido Amaral da Silva
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Recursos Florestais e Engenharia Florestal - Silvicultura
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo:16/05790-8
Vigência: 01 de junho de 2016 - 31 de maio de 2019
Assunto(s):SementesRNA-seq
Resumo
As sementes comportam-se de diferentes maneiras em relação à dessecação, sendo classificadas como ortodoxas, recalcitrantes e intermediárias. As sementes ortodoxas toleram a dessecação e o armazenamento em baixas temperaturas, diferente das sementes recalcitrantes, que apresentam sensibilidade. Há um grupo de sementes que não se encaixam nesta classificação, chamado de intermediário. As sementes ortodoxas possuem tolerância à dessecação (TD) ao final da maturação e durante a embebição, e comportam-se como recalcitrantes após a protrusão radicular. Estudos têm sido feitos com a utilização de polietileno glicol (PEG) e ABA para o restabelecimento da TD em sementes germinadas, visando o estímulo da expressão de genes e mecanismos envolvidos, permitindo a sua identificação. Este estudo fornecerá conhecimentos dos processos envolvidos na TD em sementes, possibilitando gerar informações para o aprimoramento de programas de melhoramento genético de espécies vegetais e auxiliar na conservação de sementes sensíveis à dessecação. Objetiva-se neste projeto reestabelecer tolerância à dessecação em sementes germinadas e identificar genes e mecanismos relacionados à TD. O projeto será realizado na FCA / UNESP-Botucatu. Serão feitas avaliações da perda e restabelecimento da TD em sementes de Solanum lycocarpum visando identificar genes relacionados, por meio de sequenciamento de RNA (RNAseq) seguida da validação do mesmo pela técnica de PCR em tempo real. Os dados serão avaliados estatisticamente através de teste de normalidade, análise de variância e teste de média ou análise de regressão. (AU)

Estudo funcional de vias reguladas pelos microRNAs miR159 e miR319 durante o desenvolvimento de flores e frutos de tomateiro

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Fabio Tebaldi Silveira Nogueira
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo:15/17892-7
Vigência: 01 de junho de 2016 - 31 de maio de 2018
Assunto(s):FrutoMicroRNAs
Resumo
RNAs não codantes pequenos ou sRNAs (19-25 nt) regulam tanto transcricionalmente como pós-transcricionalmente a expressão de genes endógenos, modelando o transcriptoma e a produção de proteínas. Dentre os sRNAs, microRNAs (miRNAs) desempenham papel ímpar em diversos aspectos do desenvolvimento vegetal. MiRNAs são produzidos a partir de precursores longos (pri-miRNAs), os quais são posteriormente processados por enzimas específicas, gerando o miRNA maduro (20-22 nt). Em plantas, o miRNA maduro preferencialmente "guia" a clivagem e/ou bloqueia a tradução do mRNA de genes-alvo. Recentemente, nosso grupo de pesquisa descreveu o papel da via genética regulada pelo miR156 (miR156/SPL) no desenvolvimento inicial de frutos de tomateiro (Solanum lycopersicum; Ferreira e Silva et al., 2014) e o perfil evolutivo deste miRNA (Morea et al., 2016). Posteriormente, por meio do uso de mutantes e de plantas transgênicas, nosso grupo de pesquisa identificou vias reguladas por dois microRNAs evolutivamente relacionados, miR319 e miR159, as quais parecem estar associadas com o desenvolvimento de carpelos e formação de frutos sem sementes em tomateiro. Entretanto, análises fenotípicas e moleculares detalhadas são necessárias para entender o papel das vias genéticas e hormonais associadas aos miR319 e miR159 e também o papel destes miRNAs no desenvolvimento de frutos, este último não descrito na literatura até o momento. Portanto, o presente projeto propõe caracterizar funcionalmente - utilizando mutantes disponíveis e plantas transgênicas, bem como ferramentas moleculares - as vias genéticas e hormonais que interagem e são reguladas pelo miR319 e miR159 durante o desenvolvimento reprodutivo de tomateiro. A caracterização destas vias poderá contribuir não somente para o melhor entendimento dos mecanismos associados ao desenvolvimento, mas também ter potenciais aplicações no melhoramento de tomateiro e possivelmente de outras espécies da família Solanaceae. (AU)

Interação etileno-ácido abscísico na regulação da formação de compostos voláteis durante o amadurecimento de tomates (Solanum lycopersicum) cv. Micro-Tom

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Eduardo Purgatto
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos - Ciência de Alimentos
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Processo:16/02800-2
Vigência: 01 de maio de 2016 - 30 de abril de 2017
Vinculado ao auxílio:13/07914-8 - FoRC - Centro de Pesquisa em Alimentos, AP.CEPID
Assunto(s):Fisiologia pós-colheitaExpressão gênicaCompostos voláteisHormônios vegetais
Resumo
O amadurecimento é um processo complexo a partir do qual se desenvolvem nos frutos características sensoriais que os tornam mais atraentes ao consumidor, como mudanças na textura, cor, o acúmulo de açúcares solúveis e seu balanço com ácidos orgânicos e ainda o sabor, um atributo determinado pelo gosto e aroma e crucial para a qualidade do fruto. Em tomates (Solanum lycopersicum), uma faixa de 20 a 30 metabólitos voláteis contribuem significativamente para o aroma, sendo provenientes sobretudo das vias de degradação de três substâncias: ácidos graxos, aminoácidos e terpenos. Em relação a regulação destas vias metabólicas, o papel dos hormônios vegetais sobre a biossíntese de compostos voláteis vem sendo investigado. Apesar de haver uma extensa literatura compreendendo as atribuições do etileno sobre o amadurecimento e na indução de genes codificadores de enzimas associadas à formação de ésteres, álcoois, aldeídos, terpenos e outros voláteis em frutos climatéricos, como o tomate, o conhecimento sobre o envolvimento de outros hormônios, como o ácido indol-3-acético (AIA), metil jasmonato (MJ) e o ácido abscísico (ABA) nas vias biossintéticas de compostos voláteis ainda é incipiente. Tomando essas observações como base, o objetivo de presente trabalho é avaliar a extensão da influência do ácido abscísico sobre a formação de compostos voláteis em frutos de tomateiro da cultivar Micro-Tom. Para tal, frutos colhidos no estágio mature green serão injetados com ABA e serão avaliados parâmetros de amadurecimento, como a produção de etileno, respiração e cor, os quais serão acompanhados e comparados com frutos dos grupos controle. Frutos tratados com inibidor de ação do etileno, o 1-metilciclopropeno (1-MCP) em combinação com ABA serão utilizados para avaliar se os efeitos do ABA, são etileno-dependentes. Um inibidor de síntese de ABA, a fluridona, será empregada para avaliar a formação do aroma no amadurecimento de frutos com níveis reduzidos de ABA. Os compostos voláteis serão analisados por cromatografia à gás acoplada a espectrometria de massas (CG-EM). Os padrões de transcrição de genes associados a formação do aroma em tomates (SlLOXC, SlHPL, SlADH2, SlCCD1A e SlCCD1B) serão analisados em todos os grupos experimentais. Desta forma, os resultados obtidos contribuirão para um maior entendimento a respeito do papel do ABA sobre a formação do aroma durante o amadurecimento de frutos de tomateiro e também sua relação com o etileno, em respeito a este processo. (AU)

Período de latência do tomato severe rugose vírus (ToSRV) e tomato chlorosis vírus (ToCV) e determinação do momento de aquisição dos vírus por Bemisia tabaci em tomateiro

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Jorge Alberto Marques Rezende
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo:16/01628-1
Vigência: 01 de maio de 2016 - 28 de fevereiro de 2018
Vinculado ao auxílio:12/51771-4 - Begomovírus e Crinivirus em Solanaceas: epidemiologia molecular e estratégias, AP.TEM
Assunto(s):VirologiaCrinivirusBegomovirusInfecção mistaBemisia tabaciTomate
Resumo
Tomato chlorosis virus (ToCV), família Closteroviridae, gênero Crinivirus, e Tomato severe rugose virus (ToSRV), família Geminiviridae, gênero Begomovirus, são dois vírus que atualmente comprometem a produção de tomate (Solanum lycopersicum) no Brasil. O ToCV e o ToSRV possuem o mesmo vetor, a mosca-branca Bemisia tabaci biótipo B, um inseto polífago e amplamente disseminado por todo país. Por este fato, infecções mistas destes vírus em lavouras de tomateiro estão se tornando cada vez mais frequentes. No entanto, pouco se sabe a respeito dos efeitos sinergísticos ou antagônicos desses vírus nas plantas duplamente infectadas, as alterações provocadas em parâmetros epidemiológicos importantes, como, por exemplo, o período de latência, o momento em que a planta se torna fonte de vírus para o vetor, os efeitos sobre a intensidade dos sintomas, bem como os danos ocasionados na produção. Neste trabalho pretende-se determinar o período de latência do ToSRV e ToCV em infecções simples e mista em tomateiro, em função da idade da planta na época da inoculação e também verificar o momento em que o tomateiro infectado pelo ToSRV e ToCV, separadamente ou em conjunto, se torna propício para aquisição do(s) vírus por B. tabaci biótipo B. Os resultados obtidos neste projeto fornecerão informações importantes do ponto de vista epidemiológico e poderão ser utilizados na elaboração de medidas de manejo que busquem minimizar os impactos provocados por estas fitoviroses na tomaticultura. (AU)

Seletividade de herbicidas em espécies arbóreas utilizadas em projetos de restauração vegetal

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Centro de Ciências Agrárias (CCA). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). Araras, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Patrícia Andrea Monquero
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Recursos Florestais e Engenharia Florestal - Manejo Florestal
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Processo:16/02182-7
Vigência: 01 de maio de 2016 - 30 de abril de 2017
Assunto(s):Plantas daninhasFlorestasFitotoxicidade
Resumo
O conhecimento escasso sobre o comportamento de mudas de espécies florestais nativas em relação à seletividade de herbicidas, aliado às estratégias atuais em restauração de ecossistemas naturais degradados, justifica a execução desse projeto. Serão testadas 80 espécies que ocorrem em florestas estacionais semideciduais, além de serem amplamente utilizadas em projetos de restauração: Bauhinia forficata Link., Croton urucurana Bail., Guazuma ulmifolia Lam., Inga vera Willd. , Senna Multijuga (Rich.) H.S. Irwin & Barneby, Solanum granulosoleprosum Dunal, Heliocarpus popayanensis Kunth (Heliocarpus americanus L.), Acnistus arborescens (L.) Schltdl., Alchornea triplinervia (Spreng.) Muell. Arg. , Allophylus edulis (A.St.-Hill.) Radlk., Aloysia virgata (Ruiz & Pav.) Juss., Anadenanthera colubrina (Vell.) Bren., Astronium graveolens Jacq., Balfourodendron riedelianum (Engl.) Engl., Brysonima laxiflora, Cabralea canjerana (Vell.) Mart., Campomanesia gaviroba, Campomanesia xanthocarpa O. Berg, Cariniana estrellensis (Raddi) Kuntze., Casearia gossypiosperma Briq., Cedrela fissillis Vell. , Ceiba speciosa, Centrolobium tomentosum Guillemin ex Benth. , Colubrina glandulosa Perkins, Cordia superba Cham., Cordia trochotoma (Vell.) Arrab. ex Steud, Dalbergia nigr, Eugenia brasiliensis, Eugenia pyriformis Cambess., Eugenia uniflora L., Ficus obtusifolia, Gallesia integrifolia ( Spreng. ) Harms, Gochnatia polymorpha (Less.) Cabrera, Guapira opposita (Vell.) Reitz, Guarea kunthiana A. Juss., Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC.) Mattos (Tabebuia crysotricha), Helietta apiculata Benth. , Hyeronima akchorneoides, Inga laurina (Sw.) Willd., Jacaranda micrantha, Lafoensia pacari A. St. -Hil., Lithraea molleoides (Vell.) Engl. , Luehea candicans Mart., Luehea divaricata Mart., Magnolia ovata, Miconia chamissois , Miconia rigidiuscula Cogn., Mimosa bimucronata, Mollinedia uleana, Myracridruon urundeuva Allemão, Myrocarpus frondosus Allemão, Myrsine coriacea (Sw.) R. Br. ex Roem. & Schult., Ocotea puberula (Rich.) Nees,Ocotea silvestris Vattimo , Parapiptadenia rigida (Benth.) Brenan, Peltophorum dubium (Spreng.) Taub., Piptadenia gonoacantha (Mart.) J.F. Mac- Br., Poecilanthe parviflora Benth. , Posoqueria acutifolia Mart. , Prunus myrtifolia (L.) Urb. , Psidium catteleianum Sabine, Psidium myrtoides O. Berg, Sapindus saponaria L. , Schinus terebinthifolius Raddi, Senna silvestris (Vell.) H.S. Irwin & Barneby, Solanum pseudoquina A. St.- Hil., Sorocea bonplandii (Baill.) W.C. Burguer; Lanj. & Wess. Boer, Strychnos brasiliensis (Spreng.) Mart. , Tabebuia insignis (Miq.) Sandwith, Tabebuia rosealba (Ridl.) Sandwith, Tachigali denudata (Vogel) Oliveira- Filho, Terminalia brasiliensis (Cambess, ex A.St.- Hil.) Eichler , Tetrorchidium rubrivenium, Trichillia pallens C.DC., Xylosma cilliatifolia (Clos) Eichler, Myrcia ilheosensis, Maytenus gonoclada, Eugenia Brevistyla D. Legrand, Erythroxylum argentinum O. C. Schulz, Raulinoreitzia crenulata, Erythroxylum ambiguu, Peyr. , Tibouchina granulosa Cogn. Os herbicidas sulfentrazone, oxyfluorfen e haloxyfop-methyl serão aplicados em diferentes doses (0D, 1/2D, 1D e 2 D, sendo D= dose comercial de cada produto) sobre as mudas das diferentes espécies arbóreas com o intuito de avaliar se os produtos interferem diferencialmente na sobrevivência e crescimento das mudas.Os experimentos serão conduzidos no Centro de Ciências Agrárias, UFSCar, Araras, SP. O ensaio de seletividade de herbicidas terá um delineamento inteiramente aleatorizado com quatro repetições. Após a aplicação serão avaliados a fitotoxicidade aos 7, 14, 21, 30 e 45 dias após o tratamento (DAT) ea massa da matéria seca da parte aérea aos 50 DAT. Os dados serão interpretados por meio de análises de variância (ANOVA) - cujas médias entre tratamentos serão comparadas pelos teste de Tukey ou teste t (p = 0,05) e por análises de regressão linear. (AU)

Phosphorus effects on biomass accumulation and nutrient uptake and removal in two potato cultivars

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Faculdade de Ciências Agronômicas (FCA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Rogério Peres Soratto
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Ciência do Solo
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
Processo:16/06713-7
Vigência: 01 de maio de 2016 - 31 de outubro de 2016
Assunto(s):Solanum tuberosum
Resumo
Informações sobre o efeito da adubação fosfatada na absorção e exportação de nutrientes por cultivares batata (Solanum tuberosum L.) são necessárias para o adequado manejo de nutrientes do solo. Este estudo foi realizado para avaliar como o acúmulo e a partição de matéria seca (MS), a absorção de nutrientes, e a sua alocação para os tubérculos e e exportação nas cultivares de batata (Agata e Mondial) são afetados por doses de fósforo (0, 125, 250 , 500 e 1000 kg ha-1 de P2O5) aplicadas no sulco de plantio na forma de superfosfato triplo. Um experimento foi conduzido em 2 locais-anos em Latossolos argilosos com baixa disponibilidade de P no Estado de São Paulo, sudeste do Brasil. Ambas cultivares apresentaram acúmulo MS, produção de tubérculos e absorção de nutrientes e alocação para os tubérculos muito semelhantes quando o P não foi fornecido no momento do plantio. A adubação fosfatada aumentou consideravelmente o acúmulo de MS e absorção e exportação de nutrientes de ambas as cultivares. A cultivar Mondial foi mais responsiva à adubação fosfatada e a sua absorção e exportação de N, P, K, Ca, Mg, B e Zn foram maiores do que para Agata. A aplicação de doses de P2O5 superiores a 500 kg ha-1 só aumentou a absorção de Ca e P e a exportação de P, mas o crescimento das plantas e produção de tubérculos não foram aumentadas com doses de P superiores. O índice de colheita (IC) e a alocação de nutrientes para os tubérculos não foram afetados pelas doses de P e quase não diferiu entre os cultivares. Diferenças na remoção de nutrientes entre as cultivares foram mais relacionadas com a produção de MS de tubérculos do que com o IC. (AU)

Crescimento, produtividade e qualidade de tubérculos da cultura da batata (Solanum tuberosum l.) em função da aplicação de reguladores vegetais

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Centro de Raízes e Amidos Tropicais (CERAT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Adalton Mazetti Fernandes
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Fitotecnia
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo:15/22885-0
Vigência: 01 de março de 2016 - 31 de julho de 2017
Assunto(s):Solanum tuberosumInibidores de crescimentoManejo e tratos culturais
Resumo
A produtividade da batata depende da capacidade da planta sintetizar carboidratos nas folhas e mobilizá-los para os tubérculos em crescimento. Assim, o crescimento foliar excessivo nos estágios tardios do ciclo da cultura pode afetar negativamente a produtividade de tubérculos. Em condições favoráveis ao crescimento da parte aérea das plantas, o uso de retardantes ou reguladores do crescimento vegetal pode ser uma alternativa para melhorar a produtividade da cultura, através da redução no porte das plantas e do aumento na alocação de matéria seca (MS) para os tubérculos em crescimento. Dessa forma, o objetivo deste trabalho é avaliar o efeito dos reguladores de crescimento vegetal cloreto de mepiquat, cloreto de chlormequat, placobutrazol e proexadiona cálcica no crescimento e produtividade de tubérculos das cultivares de batata Agata e Mondial. Serão conduzidos dois experimentos independentes, um com a cultivar Agata e outro com a cultivar Mondial. Ambos os experimentos serão instalados no delineamento experimental de blocos ao acaso no esquema fatorial 4x5+1, com quatro repetições. Os tratamentos serão representados por quatro reguladores vegetais (cloreto de mepiquat, cloreto de chlormequat, paclobutrazol e proexadiona cálcica), aplicados nas doses de 25, 50, 100, 200 e 400 g ha-1 do i.a., além do tratamento controle (sem aplicação de regulador vegetal). As parcelas experimentais serão compostas por cinco fileiras de plantas de cinco metros de comprimento. Serão avaliadas as seguintes variáveis na fase de enchimento dos tubérculos (70 DAP): a) número de hastes por planta e comprimento da maior haste; b) número de folhas por planta; c) área foliar e índice de área foliar; d) número de tubérculos por planta; e) acúmulo de MS na parte aérea, tubérculos e na planta inteira; e e) partição de MS para os tubérculos. Antes da dessecação da cultura será determinado o acúmulo de MS na parte aérea, tubérculos e na planta inteira. Na colheita final serão avaliados: a) número de tubérculos por planta, incidência de tubérculos deformados e peso médio dos tubérculos; b) produtividade e classificação dos tubérculos produzidos; c) índice de formato dos tubérculos; d) porcentagem de MS dos tubérculos; e) período de dormência dos tubérculos e incidência de tubérculos brotados; e f) firmeza da polpa e esverdeamento pós-colheita dos tubérculos. Os dados obtidos em cada experimento serão submetidos à ANOVA, separadamente. As médias referentes aos reguladores de crescimento serão comparadas pelo teste t (DMS) (Pd0,05), enquanto os efeitos das doses dos reguladores serão avaliados por análise de regressão (Pd0,05). (AU)

Impactos de membros da família gênica CETS no controle do amadurecimento em frutos de tomateiro

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Lázaro Eustaquio Pereira Peres
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Botânica - Fisiologia Vegetal
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Processo:16/00075-9
Vigência: 01 de março de 2016 - 31 de dezembro de 2016
Resumo
Em tomateiro (Solanum lycopersicum), o gene Solyc03g063100 possui dois alelos com efeitos opostos: Self pruning 3D (Sp3D), o qual adianta o florescimento, e single flower truss (sft), o qual inibe esse processo. Tal gene pertence à família CETS (assim chamada pelos homólogos CENTRORADIALIS, TERMINAL FLOWER 1 e SELF-PRUNING, encontrados, respectivamente, em Antirrhinum, Arabidopsis e tomateiro) (Pnueli et al., 1998), e tem função regulatória no controle da transição entre o estado vegetativo e reprodutivo em plantas. Estudos demonstram que auxinas e etileno podem induzir o florescimento em angiospermas, entretanto, a existência de uma possível interação entre os genes da família CETS com esses hormônios permanece ainda praticamente inexplorada. Resultados obtidos em nosso laboratório sugerem que plantas homozigotas recessivas para sft apresentam níveis elevados de etileno durante o período climatérico de amadurecimento de seus frutos, indicando, portanto, uma possível influência dessa proteína sobre a via de biossíntese de etileno nos tecidos de frutos carnosos. Nesse sentido, o presente projeto visa investigar se genes pertencentes à família CETS desempenhariam papel importante na regulação fina da produção de etileno em frutos de tomateiro. Para tanto, amostras de frutos de plantas controle ou portadoras dos alelos SP3D e sft serão coletados em diferentes estádios de amadurecimento e analisados quanto à coloração, taxas respiratórias, emissão de etileno e atividade total da enzima oxidase do ácido 1-aminociclopropano (ACO), a qual desempenha papel crucial na produção desse hormônio. Ao atingiram o amadurecimento completo, frutos obtidos de plantas desses três genótipos serão analisados quando a diversos atributos de qualidade, tais como Brix, teores de vitamina C, bem como conteúdo total e perfil de carotenoides. Tais análises poderão fornecer informações valiosas sobre os complexos processos de sinalização responsáveis pelo controle fino do amadurecimento de frutos de tomateiro, bem como permitir a possível descoberta de uma nova função para os genes da família CETS. (AU)

A relação entre as vias Ga ( giberelina) e age (miR156 node) no controle do florescimento em tomateiro

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Fabio Tebaldi Silveira Nogueira
Supervisor no Exterior: Erich Grotewold
Local de pesquisa: Ohio State University (Estados Unidos)
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Processo:15/23826-7
Vigência: 22 de fevereiro de 2016 - 11 de junho de 2016
Assunto(s):Desenvolvimento vegetal
Resumo
A transição do meristema apical de vegetativo para reprodutivo produz mudanças moleculares, morfológicas e fisiológicas impactando em todo o corpo vegetal. Este processo, o qual é influenciado por sinais ambientais, controle genético e regulação hormonal é conhecido como florescimento. Arabidopsis thaliana, o modelo mais conhecido para estudo do controle do florescimento possui cinco diferentes vias controlando este complexo e importante processo do desenvolvimento. Entre essas cinco rotas, autônoma, vernalização e fotoperíodo não desempenham papeis fundamentais em espécies como tomateiro (Solanum lycopersicum L.). Assim, as outras duas vias conhecidas como GA (controlada pelo fitohormônio giberelina) e AGE (controlada pela via miR156/SQUAMOSA PROMOTOR BINDING LIKE -SPL) devem desempenhar papeis essenciais controlando a mudança de fase nessa ultima espécie. Recentemente, foi demonstrado a interação física entre as proteínas SPL (alvo direto do miR156) e DELLA (regulador negativo de resposta a GA) orquestrando a interação entre essas duas vias em Arabidopsis. Interessantemente, enquanto GA promove o florescimento em Arabidopsis em condições de dias longos, atua reprimindo o florescimento em tomateiro.Com o intuito de entender as interações genéticas entre ambas as vias em tomateiro, nós produzimos duplos transgênico-mutante afetando o nível de expressão do miR156 conjuntamente com três diferentes mutações associadas a GA. Nos três mutantes, a superexpressão do miR156 promove um maior atraso no tempo de florescimento, sugerindo interação genética entre as vias GA e AGE em tomateiro. É possível que a DELLA e SPLs de tomateiro interajam fisicamente como em Arabidopsis. Além disso, nós propomos que essa interação proteína - proteína inclui a sequencia do sitio de ligação para o miR156 encontrada em algumas SPLs. Nesse projeto nos pretendemos avaliar os padrões de interação entre a única DELLA em tomateiro (PROCERA) e três diferentes SPLs através de ensaio de duplo hibrido em levedura e BiFC (ensaio de complementação fluorescente bimolecular). A conservação desta interação molecular em tomateiro e Arabidopsis controlando o florescimento indicariam que espécies reprimidas por GA e induzidas por GA, respectivamente, utilizariam vias genéticas comuns com resultados opostos no desenvolvimento. (AU)

Repelentes botânicos e nanotecnologia: desenvolvimento de sistemas para controle de pragas em agricultura

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Instituto de Ciência e Tecnologia. Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Sorocaba. Sorocaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Leonardo Fernandes Fraceto
Pesquisadores associados:Halley Caixeta de Oliveira; Renata de Lima
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo:15/15617-9
Vigência: 01 de dezembro de 2015 - 30 de novembro de 2017
Assunto(s):AgriculturaPragas de plantasSistemas de liberação de medicamentosNanopartículas
Resumo
As pragas e insetos, tem sido uma das principais causas de perdas agrícolas em todo o mundo. Só no Brasil essas perdas podem chegar a 7,7 % ao ano. A mosca-branca (Bemisia tabaci) é uma das principais pragas presentes no Brasil, sendo encontrada em inúmeras regiões. A grande preocupação com este tipo de praga, está na sua grande diversidade de hospedeiros, podendo levar a perdas de 100 % devido a capacidade de transmissão de fitopatógenos. A utilização de inseticidas sintéticos tem sido a principal forma de controle deste tipo de praga, no entanto, os efeitos adversos destes compostos tanto para o meio ambiente quanto para a saúde humana tem motivado a busca por alternativas menos impactantes. Neste contexto, diversos mecanismos estão sendo estudados a fim de minimizar estes danos, como por exemplo, o desenvolvimento de sistemas de liberação modificada, utilizando polímeros biodegradáveis e proteínas. Aliado a isto, a utiliz ação de inseticidas e repelentes botânicos também tem demostrado potencialidade para o combate a essas pragas, devido aos menores impactos causados por esses produtos de origem natural. Portanto, o presente projeto visa o desenvolvimento (preparo e caracterização) de sistemas nanocarreadores produzidos a partir dos polímeros quitosana e da proteína zeína para repelentes botân icos (geraniol e citronelal), bem como, os potenciais efeitos cito e fitotóxicos destes sistemas. O projeto visa ainda a incorporação destes sistemas em matrizes de géis reticulados, a fim de se produzir dispositivos para liberação destes ativos no campo. Ademais serão realizados ensaios de atividade repelente destes sistemas e dispositivos contra a mosca-branca (Bemisia tabaci) em diferentes culturas: tomate (Solanum lycopersicum), feijão ( Phaseolus vulgaris) e soja (Glycine max). A importância deste projeto reside na dimensão q ue o setor agrícola representa para a economia brasileira e mundial, aliado a isto o mercado de defensivos agrícolas cresce anualmente, sendo o Brasil um dos líderes no consumos destes produtos. Desta forma, o desenvolvimento de tecnologia com elevado valor agregado à área de controle de pragas em agricultura é promissora uma vez que podem ser produzidos sistemas mais eficientes no controle de pragas, menos impactantes ao ambiente e consequentemente à saúde humana. (AU)

Análise espaço-temporal dos eventos moleculares envolvidos na regeneração in vitro de tomateiro

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Lázaro Eustaquio Pereira Peres
Supervisor no Exterior: Elliot Meyerowitz
Local de pesquisa: California Institute of Technology (Estados Unidos)
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Botânica - Fisiologia Vegetal
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Processo:15/15177-9
Vigência: 10 de novembro de 2015 - 09 de julho de 2016
Assunto(s):Microscopia confocalRegulação gênicaOrganogêneseHormônios vegetais
Resumo
O processo de organogênese de novo relaciona-se à capacidade de regenerar in vitro uma planta inteira a partir de células somáticas e é a mais comum via de regeneração in vitro de plantas. Esta capacidade é frequentemente utilizada em processos biotecnológicos e cultivo de tecidos vegetais in vitro. A organogênese é altamente dependente da percepção hormonal e pode ser dividida nas fases de aquisição de competência, indução de órgãos e diferenciação morfológica. Estudos recentes envolvendo eventos de sinalização celular ocorridos nas primeiras fases do processo de regeneração tem permitido a detecção de genes e moléculas sinalizadoras relacionadas principalmente a fase de indução de novos órgãos. A atribuição da identidade de gema caulinar ao primórdio em desenvolvimento é controlada por citocinina e envolve a expressão de genes de identidade meristemática, como WUSCHEL (WUS). Entretanto, os mecanismos moleculares envolvidos na aquisição de competência são bem menos entendidos. A especificação das células originárias, o desenvolvimento de primórdio (calos organogênico) e a aquisição de competência organogênica são mediados por auxina e relacionados a expressão do gene CUP-SHAPED COTYLEDON2 (CUC2). Os avanços na área são quase completamente baseados em estudos com Arabidopsis thaliana, mas importantes espécies de interesse econômico não seguem estritamente o modelo bem explorado de Arabidopsis: O tomateiro Solanum lycopersicum, cultivar Micro-Tom (MT), não tem a habilidade de regenerar brotos caulinares a partir de explantes radiculares ou calus induzidos. Em MT, dois genes potencialmente envolvidos no controle da competência organogênica são PROCERA (PRO) e REGENERATION1 (RG1), indicando uma competência comum na formação de raízes e brotos caulinares. Meus resultados preliminares definem temporalmente as fases de aquisição de competência e indução da organogênese e macroscopicamente evidenciam a influência de auxina e citocininas durante o processo de regeneração em MT. No entanto, mecanismos hormonais e genéticos envolvidos em organogênese de tomateiro permancem obscuros. Assim, através da investigações de genes hormonais e relacionados a organogênese fusionados a genes repórteres, somados a imagens de alta resolução, o objetivo deste projeto é determinar espaço-temporalmente os mecanismos de organogênese de novo em MT e estabelecer as diferenças moleculares entre os padrões de desenvolvimento envolvidos na regeneração de tomateiro e Arabidopsis. (AU)

Caracterização funcional das proteínas PIF (phytochrome-interacting factor) de Solanum lycopersicum

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Maria Magdalena Rossi
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Botânica
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Processo:15/14658-3
Vigência: 01 de novembro de 2015 - 31 de janeiro de 2019
Resumo
Além de prover energia para as reações fotossintéticas, a luz é fundamental para a manutenção de ritmos diários e a progressão do desenvolvimento ao longo de todo o ciclo de vida das plantas. O sinal luminoso é percebido por fotorreceptores e as respostas adaptativas compreendem uma complexa rede regulatória da qual participam as proteínas de interação a fitocromos (PIFs). As PIFs são fatores de transcrição que regulam negativamente as respostas à luz e realizam a intercomunicação com vias de sinalização hormonal. A participação dessas proteínas em diferentes processos fisiológicos desde a germinação até a floração foi caracterizado apenas em Arabidopsis thaliana. Desde o desestiolamento até na senescência foliar, as PIF tem um importante papel na regulação da biogênese e manutenção plastidial. Durante a germinação, as plântulas, ainda no escuro, acumulam PIFs que inibem a biossíntese de Chls e a biogênese de cloroplastos, além de induzir o alongamento do hipocótilo. Quando atingem a luz, as plântulas acumulam clorofilas e assumem um padrão de desenvolvimento fotomorfogênico à medida que os níveis de PIF decaem. Em plantas adultas, as PIF regulam os ritmos de crescimento diários e a senescência foliar induzida por escuro e idade. Neste último processo, o papel destes fatores de transcrição é induzir a expressão de SAGs (senescence-associated genes) que levarão ao desmantelamento do aparato fotossintético, degradação das clorofilas e dos cloroplastos. A manutenção de cloroplastos fotossinteticamente ativos em folhas fonte e na transição de cloroplastos a cromoplastos durante o amadurecimento são importantes determinantes da produtividade e qualidade de frutos carnosos. Assim, considerando a importância das PIF na biogênese e manutenção plastidial e a relevância dos cloroplastos para a produtividade, este projeto propõe a caracterização funcional das PIF na espécie modelo Solanum lycopersicum. Para isso, inicialmente por meio de uma análise fenética serão identificados os genes PIF de tomateiro e determinada a relação de ortologia com os correspondentes de A. thaliana. Em seguida, visando obter informação sobre a especificidade funcional dos diferentes genes, a expressão de cada PIF será avaliada durante o desetiolamento, senescência foliar induzida por escuro bem como durante o desenvolvimento e amadurecimento de frutos. A partir dos resultados dessas análises serão escolhidos pelo menos três genes cujo padrão de expressão varie ao longo de cada um dos três processos avaliados para sua caracterização funcional. Plantas transgênicas de tomateiro silenciadas para cada um dos genes selecionados serão geradas e avaliadas no que tange à diversos parâmetros de crescimento, do metabolismo de carbono, da produtividade e da qualidade nutricional dos frutos. Com base nas alterações fenotípicas e metabólicas encontradas, outras análises poderão ser realizadas a fim de destrinchar os mecanismos regulatórios responsáveis pelas diferenças observadas. Assim, com este projeto pretende-se compreender o papel desempenhado pelas PIFs na regulação de importantes processos fotomorfogênicos e metabólicos que afetam a produtividade e qualidade nutricional de um fruto carnoso de alta importância na dieta humana como o tomate. (AU)

Análise de interações entre o Tomato severe rugose vírus (ToSRV) e o Tomato chlorosis vírus (ToCV) em tomateiro

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Jorge Alberto Marques Rezende
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo:15/14876-0
Vigência: 01 de novembro de 2015 - 31 de outubro de 2017
Vinculado ao auxílio:12/51771-4 - Begomovírus e Crinivirus em Solanaceas: epidemiologia molecular e estratégias, AP.TEM
Assunto(s):CrinivirusBegomovirus
Resumo
O Tomato severe rugose virus (ToSRV) e o Tomato chlorosis virus (ToCV) pertencem aos gêneros Begomovirus e Crinivirus, respectivamente e ocorrem de maneira generalizada em lavouras de tomateiro (Solanum lycopersicum) no Brasil. Estes vírus afetam o desenvolvimento e a produção das plantas, em infecções simples e mistas. Ambos são transmitidos por um mesmo vetor, amplamente disseminado em todo o país, o aleirodídeo Bemisia tabaci biótipo B. O ToSRV é a espécie de begomovirus que prevalece em plantios de tomateiro no Brasil. O ToCV foi relatado no Brasil em 2006, infectando plantas de tomate no Estado de São Paulo e atualmente encontra-se presente em diversos estados brasileiros. Até o momento não se tem informações sobre a interação desses vírus nas plantas duplamente infectadas e as consequências quanto aos sintomas, danos e interações com o vetor. Este trabalho visa analisar a concentração do ToSRV e ToCV em infecções simples e mistas por Real Time PCR e qRT-PCR; avaliar os sintomas e o desenvolvimento das plantas infectadas e estudar o efeito de diferentes concentrações desses vírus nas plantas nos processos de aquisição e transmissão pelo vetor. O conhecimento dos efeitos da infecção mista pelo ToSRV e ToCV em tomateiro e o efeito de concentrações desses vírus nos processos de aquisição e transmissão pelo vetor são importantes para o melhor conhecimento dos patossistemas e estabelecimento de linhas de investigações que conduzam às estratégias de manejo das doenças. (AU)

Desenvolvimento de nanopartículas funcionalizadas com folato para o carreamento de glicoalcalóides de Solanum lycocarpum e avaliação biológica em modelos de cultivo celular 2D e 3D

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Maria Vitória Lopes Badra Bentley
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Farmácia - Farmacotecnia
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo:15/14665-0
Vigência: 01 de novembro de 2015 - 31 de outubro de 2017
Assunto(s):NanopartículasSolanum lycocarpumCultura de célulasNanotecnologia
Resumo
O carcinoma de bexiga (CB) é a segunda doença maligna mais comum do trato urinário sendo responsável por cerca de 165 mil óbitos/ano no mundo. As principais terapias para o CB incluem a imunoterapia com BCG e quimioterapia. Porém, a eficácia dessas são baixas. O tratamento do CB pela via intravesical é um desafio devido a baixa permeabilidade das moléculas no urotélio e ao baixo tempo de residência do fármaco no local, devido ao esvaziamento periódico da bexiga. Assim, uma estratégia para conseguir transpor estes desafios é a aplicação da nanotecnologia. Os glicoalcaloides (GA) solasonina (SS) e solamargina (SM), extraídos dos frutos de Solanum lycocarpum, apresentam propriedades anticarcinogênicas. Nesta linha, o presente projeto visa o desenvolvimento e caracterização de nanopartículas de poli(ácido lático) (PLA) funcionalizadas com folato contendo extrato alcaloídico dos frutos de S. lycocarpum com alto teor de SS e SM, visando a obtenção de um sistema que aumente o tempo de permanência destas moléculas na bexiga e a permeação dos compostos no urotélio. Para isto, o extrato, contendo os GA, serão encapsulados em nanopartículas de PLA pelo método de nanoprecipitação. As partículas serão funcionalizadas com folato visando a obtenção de um sistema sítio-específico para células tumorais e serão caracterizadas por diferentes técnicas. Após essas avaliações e otimização do processo de preparo da formulação, ensaios in vitro em modelo de cultivo de células de câncer de bexiga 2D e 3D serão realizados, assim como ensaios moleculares. Desta forma, espera-se, além do desenvolvimento de uma formulação nanoestruturada para o tratamento do CB com compostos oriundos do metabolismo secundário da espécie S. lycocarpum, o desenvolvimento de uma plataforma de estudos de citotoxicidade de nanoestruturas em 3D. (AU)

Efeitos do excesso de lipídeos saturados e do extrato de Solanum melongena na dieta materna sobre os parâmetros reprodutivos de ratos machos adultos

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Rejane Maira Góes
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo:15/15709-0
Vigência: 01 de outubro de 2015 - 30 de novembro de 2018
Assunto(s):Testículo
Resumo
Sabe-se que perturbações na nutrição materna podem levar a adaptações permanentes na fisiologia de vários órgãos da prole, mas as consequências para o testículo e parâmetros reprodutivos masculinos são pouco compreendidas. Dados obtidos recentemente mostraram que a obesidade materna associada ao excesso de lipídeos insaturados na dieta reduz a produção espermática de ratos na idade adulta, sugerindo que as fases de gestação e lactação são particularmente sensíveis a esses dois fatores ambientais. Assim, torna-se relevante examinar se isso também ocorre no caso da ingestão de lipídeos saturados. Os componentes da dieta podem ter um efeito benéfico à saúde. É o caso da berinjela (Solanum melongena) que apresenta várias propriedades benéficas como a ação antioxidante e hipocolesteronêmica. O objetivo deste trabalho é avaliar as consequências da dieta materna enriquecida com lipídeos saturados, com extrato da casca da berinjela ou ambos sobre os parâmetros reprodutivos de ratos adultos. Serão utilizados quatro grupos (n=10 por grupo) de ratos Wistar adultos (12 sem de idade) filhos de mães tratadas com ração padrão (C), ração enriquecida com banha de porco (L), com extrato da casca da berinjela (E) ou com ambos (LE). A alimentação materna iniciará oito semanas antes do acasalamento. A dieta enriquecida com lipídeos conterá 31,2% de banha de porco. O extrato da casca será obtido por extração em solução aquosa de etanol a 50% e o produto seco será diluído em água destilada de modo a resultar em um consumo diário de 2mg de extrato/100 g de peso corporal por animal, a administração será realizada via oral (gavagem) desde o desmame (3a semana) até a 12a semana de vida da mãe, quando haverá o acasalamento , sendo contínua durante a gestação e lactação (21 dias). Os ratos serão analisados com relação a vários parâmetros biométricos e metabólicos, incluindo perfil lipídico, dosagem de testosterona e estrógeno. Os testículos serão avaliados quanto à histologia, porcentagem dos principais compartimentos teciduais e diâmetro dos túbulos seminíferos. A expressão dos receptores de andrógeno, do receptor ativador da proliferação dos peroxissomos tipo gama e do receptor X do fígado tipo ± serão examinadas por imunocitoquímica e Western blotting. Análises bioquímicas da atividade das enzimas antioxidantes catalase, glutationa S-transferase, glutationa peroxidase e superóxido dismutase serão examinadas, bem como do nível de peroxidação lipídica nas amostras testiculares e no plasma. Serão estimados os seguintes parâmetros espermáticos: contagem espermática testicular, produção diária de espermatozoides, reserva espermática e tempo de trânsito dos espermatozoides nas regiões do epidídimo, motilidade e viabilidade dos espermatozoides. Essa investigação fornecerá informações inéditas sobre os efeitos de lipídeos saturados e do extrato de berinjela na dieta materna sobre a morfologia e fisiologia testicular da prole, ampliando o conhecimento sobre a influência de componentes alimentares na programação do desenvolvimento testicular e suas possíveis implicações para a reprodução animal. (AU)

De novo transcriptome assembly and analysis to identify potential gene targets for RNAi-mediated control of the tomato leafminer (Tuta absoluta)

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Antonio Vargas de Oliveira Figueira
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
Processo:15/16869-1
Vigência: 01 de outubro de 2015 - 31 de março de 2016
Assunto(s):GenômicaRNA-seqInterferência de RNALepidopteraInativação gênica
Resumo
Background: O fornecimento de RNA dupla fita (dsRNA) a insetos demonstrou silenciar genes-alvo em insetos, e essa abordagem emergiu como um método potencial de controle de pragas agrícolas por meio de transformação de plantas para expressar dsRNAs de insetos. Uma etapa crítica dessa tecnologia é a seleção de genes-alvo eficazes, essenciais para o desenvolvimento e/ou sobrevivência do inseto. A traça do tomateiro (Tuta absoluta Meyrick) éuma praga importante do tomateiro (Solanum lycopersicum) que causa perdas significativas e recentemente invadiu a Europa, de onde está se espalhando numa rapidez alarmante. Para explorar o RNA interferente (RNAi) contra T. absoluta, informações sobre sequências de genes-alvo potenciais é necessária, mas apenas poucas sequências estão disponíveis em bancos de dados públicos. Resultados: Nós sequenciamos seis bibliotecas de amostras de RNA de ovos, adultos, e larvas em quatro estágios, obtendo um total de cerca de 245 milhões de reads. A montagem do trasncritoma de T. absoluta contém 93,477 contigs com tamanho médio de 1.574 bp, 59,8% dos quais apresentaram identificação positiva por Blast, e com 19.995 (21.4%) anotados por ontologia gênica. Do transcritoma, a maioria dos genes centrais do mecanismo de RNAi de Lepidopteras foram identificados indicando a potencial adequação de T. absoluta para o silenciamento gênico. Nenhum contig apresentou similaridade significativa com uma polimerase RNA-dependente. Genes da rota de biossíntese do hormônio juvenil e de ecdisteroides foram identificados, representando genes alvos potenciais para silenciamento sistêmico. Comparações dos perfis de transcritos entre os estágios revelaram 1.577 genes diferencialmente expressos entre os estágios larvais precoces, dos quais potenciais genes alvo foram identificados. Cinco desses genes foram avaliados usando dsRNA transcritos in vitro, que foram absorvidos por folíolos de tomateiro, que foram oferecidos a larvas de T. absoluta do 1o. instar, resultando numa redução significativa do peso do corpo das larvas, enquanto demonstrou um redução significativa na expressão de três desses genes. Conclusões: O transcritoma gerado representa um recurso genômico valioso para selecionar genes alvo potenciais que afetam o desenvolvimento ou a sobrevivência de larvas de T. absoluta. Cinco novos genes que demonstraram maior expressão no 1o. instar larval foram capazes de ser alvos efetivos para RNAi levando a redução do peso larval e podem ser considerados bons candidatos para uso em proteção de cultivos mediado por RNAi. (AU)

Regulação da arquitetura carpelar e desenvolvimento de frutos de tomateiro (Solanum lycopersicum) via miR319/LANCEOLATE

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Fabio Tebaldi Silveira Nogueira
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo:15/07171-0
Vigência: 01 de setembro de 2015 - 30 de junho de 2016
Assunto(s):MicroRNAs
Resumo
Os fatores de transcrição do tipo Teosinte Branched1/Cycloidea/PCF (TCP) controlam diferentes aspectos do desenvolvimento vegetal, como morfogênese foliar, simetria floral e padrão de ramificação. Em tomateiro (Solanum lycopersicum), a mutação natural no gene TCP LANCEOLATE (LA) promove drástica alteração da arquitetura vegetativa; em vez da característica folha composta de tomateiro, plantas mutantes LA desenvolvem folhas simples de margens não recortadas. A mutação no gene LA está localizada no sítio de reconhecimento do microRNA miR319 , o que impede a regulação correta dos níveis de transcritos do gene LA durante a morfogênese foliar. Interessantemente, plantas mutantes LA também apresentam frutos delgados e alongados, embora esse fenótipo do fruto não tenha sido ainda descrito. O fruto é uma das últimas estruturas a serem formadas durante o ciclo de vida dos vegetais, no entanto, sua forma e tamanho são determinados previamente durante a formação e determinação dos verticilos florais. É possível que a via miR319/LA regule o desenvolvimento da estrutura do carpelo no eixo de crescimento proximal-distal durante a fase inicial da formação dos órgãos florais, provavelmente via controle da distribuição de auxina. Portanto, o objetivo deste projeto é avaliar o papel da via miR319/LA na formação dos carpelos e desenvolvimento do fruto de tomateiro. (AU)

Turnip mosaic vírus: levantamento, identificação, caracterização biológica e molecular, e aspectos epidemiológicos dos isolados brasileiros que infectam brássicas

Beneficiário:
Instituição-sede da pesquisa: Instituto Biológico (IB). Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios (APTA). Secretaria de Agricultura e Abastecimento (São Paulo - Estado). São Paulo, SP, Brasil
Pesquisador responsável:Marcelo Eiras
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Processo:15/10730-1
Vigência: 01 de julho de 2015 - 31 de dezembro de 2016
Vinculado ao auxílio:14/22594-2 - Turnip mosaic vírus: levantamento, identificação, caracterização biológica e molecular, e aspectos epidemiológicos dos isolados brasileiros que infectam brássicas, AP.R
Assunto(s):PotyvirusBrassica
Resumo
O Turnip mosaic virus (TuMV, Potyvirus) tem amplo círculo de hospedeiros e causa danos em culturas de importância econômica, incluindo principalmente as brassicas [couve, couve-flor, couve-brócolo, repolho (Brassica oleracea), nabo (B. rapa), mostarda-de-folha (B. juncea), canola (B. napus) e rabanete (Raphanus sativus)]. Acredita-se que as muitas espécies de plantas da vegetação espontânea, principalmente das famílias Brassicaceae [mostarda-selvagem (B. juncea), mentruz (Coronopus didymus), mastruz (Lepidium virginicum), nabiça (Raphanus raphanistrum), rabanete selvagem (R. sativus), mostarda-branca (Sinapsis arvensis), entre outras] e Solanaceae [joá-de-capote (Nicandra physalodes), camapu (Physalis angulata) e Solanum spp.)], possam ter um importante papel na epidemiologia do TuMV, tanto como reservatórios do vírus como de seus afídeos vetores. Portanto, sementes de diferentes espécies de brassicas e solanáceas da vegetação espontânea serão coletadas, e/ou também obtidas de laboratórios de pesquisa de plantas daninhas, semeadas, sendo as plântulas, aproximadamente 15 dias após a emergência, inoculadas mecanicamente com isolados de TuMV. O bolsista deverá participar de todas as etapas desse processo, desde a coleta das sementes, identificação das plantas em nível de espécie, identificação biológica, sorológica e molecular dos isolados virais, inoculações mecânicas e avaliações do desenvolvimento dos sintomas e indexações biológicas, sorológicas e moleculares, antes e após as inoculações. (AU)
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