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Resumo

Espécies leveduriformes do gênero Candida são os principais causadores de doenças oportunistas e potencialmente prejudiciais à saúde do homem com destaque a C. albicans, C. krusei, C. tropicalis, C. glabrata e C. parapsilosis. Possuem mecanismos de virulência de grande complexidade como a formação de biofilmes, os quais geram dificuldades no tratamento da doença como, a candidíase vulvovaginal (CVV). O Syngonanthus nitens vem mostrando-se importante no controle de espécies de Candida, e aplicável na terapêutica da CVV em estudos do nosso grupo de pesquisa utilizando o extrato metanólico de escapos. Pelos benefícios apresentados por esta espécie vegetal, é relevante aplicar ferramentas que propiciam aumento dos parâmetros biodisponívies da mesma, como a incorporação do extrato vegetal em uma plataforma nanotecnológica de liberação de fármacos como os carreadores lipídicos. Este trabalho objetiva avaliar o comportamento do extrato metanolico de escapos de S.nitens e cinco frações isoladas na forma não incorporada e incorporada em um sistema lipídico nanoestruturado na investigação da potencialidade antifúngica frente a C. krusei, C. tropicalis, C. glabrata e C. parapsilosis de origem clínica e ATCC com perfil de resistência aos azois. Será avaliada a capacidade inibitória desses derivados vegetais em biofilmes monotípicos e heterotípicos relacionados com a CVV, e a atividade antifúngica será determinada por microdiluição. A fração vegetal que apresentar melhor atividade será incorporada no carreador lipídico. Espera-se contribuir com a aplicabilidade do extrato vegetal de S. nitens no combate a espécies de Candida que vem aumentando sua frequência em casos de CVV, assim como verificar a possível aplicação no controle ou inibição dos biofilmes produzidos por estes micro-organismos. (AU)

Resumo

O bolsista irá participar das atividades relativas aos itens 1 a 2 e 6 dos objetivos do projeto temáticos e as metodologias são descritas a baixoItem 1 - Determinação dos efeitos tóxicos para formigas cortadeiras, para seu fungo simbionte e ação inibitória de enzimas.1.1 Para formigas cortadeiras: Os efeitos tóxicos de extratos vegetais e compostos puros isolados pelo bolsista serão avaliados através de bioensaios, envolvendo aplicação tópica e incorporação em dietas artificiais sólidas conforme metodologia já desenvolvida pelo grupo. 1.2 - Para o fungo simbionte: Os extratos, suas frações, subfrações ou moléculas serão incorporados ao meio de cultura específico para o fungo simbionte ou para outros microrganismos a serem testados para determinação do nível de inibição. A metodologia aplicada nos ensaios com o fungo simbionte foi desenvolvida em nosso laboratório. 1.3 - Inibição enzimática: As atividades despolimerásicas de extratos de meios de cultivo do fungo simbionte, do líquido fecal de formigas e de frações cromatográficas contendo despolimerases purificadas, serão avaliadas quanto à susceptibilidade a inibição por extratos vegetais ou componentes purificados destes extratos. Para tanto as atividades das enzimas serão determinadas na presença ou na ausência dos extratos, frações e compostos puros.Item 2 - Fracionamentos químicos de extratos orgânicos das plantas. Os extratos vegetais dos frutos de Trichilia catigua e folhas de T. elegans preparados a partir de material seco e moído em etanol e particionados em diferentes solventes orgânicos (Etanol-água/hexano/acetato de etila/isopropanol) serão fracionados através de cromatografia em coluna utilizando sílica comum e do tipo "flash", em camada delgada, em contracorrente de gota, HPLC e partição. As identificações das substâncias isoladas serão realizadas através de análises de dados espectrais (Ressonância magnética nuclear de hidrogênio, de carbono-13, espectrometria de massas, infra-vermelho e ultra-violeta). Item 6 - Obtenção de complexos produtos naturais-metais para potencializar a ação inseticida e fungicidaSerão realizadas sínteses de complexos do tipo cis-[M(bpy-X)2(Cl2)] onde M = Co(II/III), Cu(II/III), Mn(II/III), Fe(II/III) com os ligantes bpy-X = 2',2'-bipiridina (X =H) e 2',2'-bipiridinas substituídas com grupos cloro-, metil-, nitro- e 4,7 difenil-, X = H2O, Cl por reação direta, seguindo resultados da literatura. Os novos complexos do tipo [M L'-L')(X)(inseticida)]2+/3+, podem ser sintetizados a partir do complexo cis-[Mn(bpy-X)(Cl)2} promovendo o deslocamento do grupo lábil Cl- pelo inseticida, onde a coordenação deve ocorrer pelo grupo C=O ou OH. Os compostos CaCl2, ZnCl2 e MgCl2 reagirão diretamente com os potenciais inseticidas naturais ricinina, catequina, arborinina, flavona, 7-metóxiflavona, 3-(1',1'-dimetilalil)-7-hidroxi-8-metoxicumarina e xantiletina formando compostos do tipo [Ca(H2O)Ln]2+, [Zn(H2O)Ln]2+ e [Mg(H2O)Ln]2+, onde n = 1 ou 2 segundo a literatura4. Caso seja necessário para viabilizar as reações, os ligantes cloros podem ser substituídos por H2O por reação com triflato de prata. Os grupos ligantes dos inseticidas podem ser ionizados por ação de mudanças nos valores de pH do meio, caso necessário para coordenarem.As caracterizações dos complexos e estudos de pH, solvente e temperatura serão realizadas por análise elementar (C, H, N e metal), técnicas espectroscópicas (UV-Vis, IV, RMN de 1H e 13C e EPR) e eletroquímicas (voltametria cíclica e de pulso).Os compostos reagentes MnCl2, CoCl2, FeCl2,CuCl2, ZnCl2, CaCl2 e MgCl2 e os ligantes polipiridinico 2',2'-bipiridina e 2',2'-bipiridinas substituídas serão adquiridos com grau analítico. (AU)

Resumo

Cerca de 20.000 acidentes ofídicos ocorrem por ano no Brasil, e destes casos 0,4% chegam ao óbito. Muitos efeitos colaterais são atribuídos à soroterapia, uma vez que, são administrados anticorpos estranhos ao nosso organismo. Há ainda, a difícil neutralização da lesão tecidual local no envenenamento provocado por serpentes do gênero Bothrops sp. e Crotalus sp. Na busca por terapias alternativas complementares e mais econômicas recorre-se ao uso de plantas medicinais. A utilização de extratos vegetais é comum em locais onde o acesso à soroterapia se torna demorado ou quase impossível. A flora brasileira possui uma ampla variedade de plantas medicinais com potencial antiofídico. Muitas espécies da flora brasileira são pouco estudadas quanto à avaliação da eficácia e dos efeitos terapêuticos de extratos brutos vegetais e compostos isolados. Uma dessas plantas é a espécie Serjania erecta Radlk, conhecida popularmente como “retrato de teiú” e “cipó cinco folhas”, pertencente á família das Sapindaceas. Em estudo anterior foi realizada a detecção de metabólitos secundários de interesse farmacológico, como flavonóides e saponinas. Até hoje não foi realizado nenhum estudo avaliando o potencial antiofídico desta espécie vegetal. Outra espécie da mesma família, Sapindus saponaria L., comumente denominada saboneteira, morcegueira ou cassiteira é caracterizada como um complexo químico com diversas atividades e ações farmacológicas devido a presença de lipídeos, flavonóides e saponinas. Outra espécie vegetal é a Schizolobium parahyba, conhecida popularmente como guapuruvú; e umbela;, pertencente á família Caesalpinoideae e que é usada na forma de chá e infusão no tratamento de acidentes ofídicos. Desde o ponto de vista biotecnológico é interessante o uso de cultura de células vegetais para a obtenção de compostos biologicamente ativos, uma vez que essa produção independente de condições climáticas e ambientais. Até hoje não foi realizado nenhum estudo avaliando o potencial antiofídico destas espécies vegetais, bem como de seus compostos isolados. A obtenção de cultura de células vegetais destas espécies é algo inédito, assim como o estudo de seu potencial farmacológico. Neste estudo será realizado a avaliação da atividade inibitória dos extratos vegetais, das frações e dos compostos isolados de Serjania erecta (in natura e in vitro), Sapindus saponaria (in natura e in vitro) e Schizolobium parahyba (in natura) sobre os efeitos tóxicos e farmacológicos induzidos pelas peçonhas de serpentes do gênero Bothrops e Crotalus, além de proteínas isoladas, a fim de verificar seu potencial antiofídico. Também serão realizados estudos estruturais de interação molecular entre a toxina e seus inibidores através de técnicas experimentais de co-cristalização ou simulação molecular computacional. (AU)

Resumo

A aplicação de ingredientes naturais em alimentos, fármacos e cosméticos tem se tornado uma tendência mundial e despertado o interesse da comunidade científica e de indústrias quanto à investigação fitoquímica e aplicação tecnológica de extratos vegetais, sobretudo aqueles ainda subexplorados. Considerando a biodiversidade brasileira, seu potencial de aproveitamento e a necessidade de um modelo de desenvolvimento econômico sustentável, pesquisas envolvendo produtos genuinamente nacionais assumem uma importância significativa. Nesse sentido, destacam-se as frutas nativas que na maioria das vezes estão restritas às comunidades onde a disseminação ocorre espontaneamente. O consumo regular de frutas, e seus compostos fenólicos, tem sido relacionado à menor incidência de patologias desencadeadas pelo estresse oxidativo como câncer, diabetes, enfermidades cardiovasculares, bem como processos inflamatórios. A crescente preocupação com o uso de antioxidantes sintéticos em alimentos também sugere a necessidade de estudos sobre a composição química e atividade antioxidante destas espécies vegetais. Portanto, este trabalho tem como objetivo avaliar a composição fenólica e o potencial antioxidante in vitro e a atividade anti-inflamatória in vivo de frutíferas nativas brasileiras (polpa, casca, semente de frutos e folhas), ampliando assim as informações disponíveis sobre a composição bioativa, na expectativa de que estes resultados propiciem avanços no conhecimento, contribuam para a preservação da flora nativa e gerem renda aos pequenos produtores. (AU)

Resumo

O perfil metabólico de um extrato de planta nos dá informações sobre os compostos biologicamente ativos presentes no extrato. Este fingerprint tem estimulado abordagens integradas capazes de fornecer informações acerca dos processos de sinergismo e das interações envolvidas nas respostas farmacológicas de matriz es bioativas complexas. Este projeto tem como objetivo contribuir para o conhecimento da composição química de sementes de cumaru (Dypterix odorata), através do estabelecimento do perfil eletroforetico (fingerprint) de metabólitos secundários presentes em extratos polares e apolares, caracterizar o perfil termoanalítico da semente, com quantificação da cumarina e avaliar a atividade antioxidante dos extratos brutos, tentando identificar qual/quais os metabólitos secundários estão envolvidos nesta atividade. A semente de Cumaru é bastante utilizada na região norte para a fabricação de xaropes, os quais são empregados como antiespasmódicos, podendo ser também empregada com aplicações farmacológicas e cosméticas. Apesar disto, não existem, até o momento, relatos a respeito da composição total de metabólitos secundários dos extratos das sementes. (AU)

Resumo

O objetivo do presente estudo será avaliar, in vivo, a resposta biológica imediata e tardia de soluções aquosa e etanólica preparadas com extrato vegetal de Araçá (Psidium cattleianum) associadas ao Hidróxido de Cálcio Ca(OH)2 e para o grupo controle será utilizada a pasta de Ca(OH)2 associado a Peopilenoglicol. Para a análise edemogênica (resposta imediata), serão utilizados 30 ratos machos (Rattus norvegicus). Sob anestesia geral, os animais receberão injeção intravenosa de azul de Evans a 1%. Após 30 minutos, será injetado 0,1mL das pastas, na região subcutânea dorsal. Os animais serão sacrificados após 3 e 6 horas e as peças obtidas colocadas em formamida por 72 horas. A leitura da análise edemogênica será realizada em espectrofotômetro com comprimento de onda de 630nm. Para a análise microscópica (resposta tardia), tubos de polietileno contendo as soluções aquosa, etanólica e de propilenoglicol associadas ao Ca(OH)2 serão implantados na região dorsal de 24 ratos machos, que serão mortos após 7, 30, 60 e 90 dias e as peças processadas para interpretação. (AU)

Resumo

Artemisia annua L., um arbusto que ocorre naturalmente na China e no Vietnã, tem sido amplamente utilizada no tratamento de Malária. Entre os metabólitos secundários isolados das espécies do gênero Artemisia, os mais característicos são as lactonas sesquiterpênicas, sendo a artemisinina (quinghaosu) (1,2%/p), a que apresenta eficiência no tratamento de casos de malária causadas pelo Plasmodium falciparum. A espécie é a única fonte economicamente viável dessa molécula. No Brasil, o cultivo da A. annua foi adaptado às condições climáticas do Sudeste brasileiro pelo Centro Pluridisciplinar de Pesquisas Químicas, Biológicas e Agrícolas (CPQBA-UNICAMP). No processo de produção deste importante antimalárico é gerado um resíduo de extração significante com alta atividade farmacológica, como propriedades anti-inflamatória, antimicrobiana e antioxidante. Neste contexto, o objetivo principal deste projeto é desenvolver um produto cosmético com propriedades anti-inflamatória, antimicrobiana e antioxidante, relacionadas ao extrato residual de A. annua L. resultante da extração de artemisinina para produção da droga antimalárica, levando a um melhor aproveitamento da planta. O CPQBA-UNICAMP, detentor do registro de cultivar no Ministério da Agricultura, cultivará a planta (180Kg) e fornecerá o material seco e moído. O LASEFI-FEA-UNICAMP (Laboratório de Tecnologia Supercrítica: Extração, Fracionamento e Identificação de Extratos Vegetais), que desenvolve pesquisas na área de fluidos supercríticos desde 1986, e tem como principal foco de pesquisa a extração de compostos bioativos a partir de matrizes biológicas, desenvolverá o processo de extração supercrítica fracionada empregando (CO2) para obtenção dos extratos da A. annua, com diferentes composições químicas. Os estudos e aplicações industriais de tecnologias envolvendo fluidos supercríticos, que utilizam como solventes substâncias inofensivas ao meio-ambiente e à saúde humana, como CO2, tem se intensificado nos últimos anos. Além do extrato residual, otimizará a produção de coprodutos como óleo essencial e artemisinina. Posteriormente, será também responsável pelo processamento dos 180kg de planta. A S Cosméticos do bem será responsável pelos ensaios de formulação com incorporação do extrato residual a uma base de creme desenvolvida pela equipe de farmacêuticos da empresa. Formulações, contendo diferentes concentrações do extrato residual (princípios bioativos), serão submetidas aos testes de atividades anti-inflamatória, antimicrobiana e antioxidante. A prospecção e quantificação da artemisinina e seus derivados, fundamental para a obtenção de novos produtos para a indústria cosmética, será realizada no Laboratório Thomson de Espectrometria de Massas (IQ-UNICAMP). A composição do complexo fitoquímico presente no extrato residual, determinado por MS, será correlacionado com os resultados dos testes in vitro e ex vivo resultando num método de padronização pioneiro na área cosmética. O produto cosmético final será submetido ao teste de estabilidade e eficácia e segurança. Uma vez comprovadas a eficácia e segurança e as propriedades terapêuticas da formulação contendo o extrato residual, a S Cosméticos do Bem produzirá 1000 unidades de 50g cada a título de MVP (Minimum Viable Product), com intuito de introduzir o produto no mercado. Outros produtos poderão também ser formulados empregando o extrato residual de A. annua, tais como produtos para cabelo e tratamento labial, para atender o público com pré-disposição para desenvolver alterações dermatológicas. (AU)

Resumo

Nos dias atuais, temas relacionados ao meio ambiente, como desenvolvimento sustentável e preservação dos recursos naturais estão sendo discutidos e abordados com muita frequência em grandes eventos, científicos ou não, de diversas áreas do conhecimento. Em sincronia, estudiosos vêm desenvolvendo e aplicando novas técnicas cujos objetivos envolvem reduzir a produção de substâncias tóxicas nos meios industrial e comercial a fim de proteger desde o meio ambiente até a saúde humana. Nesse contexto, a preparação e análise de fitoterápicos, bem como a credibilidade deles no tratamento e na cura de doenças ganham proporções consideráveis, visto que nas análises cromatográficas de determinação do(s) princípio(s) ativo(s) em extratos vegetais utilizam solventes considerados não-verdes, ou seja, causadores de efeitos nocivos. Para a execução dessas investigações, frequentemente emprega-se a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). No entanto, essa técnica utiliza, na grande maioria dos estudos analíticos, solventes e modificadores altamente tóxicos como a acetonitrila e o ácido trifluoroacético que geram resíduos que potencializam os impactos ambientais. Com o objetivo de contribuir com a preservação, ou recuperação, do meio ambiente, este projeto visa desenvolver métodos analíticos ambientalmente amigáveis para a determinação de princípios ativos em fitoterápico e extrato de Cynara scolymus L. (alcachofra) por CLAE, espécie medicinal presente na Relação Nacional de Plantas Medicinais de Interesse do SUS (Renisus). (AU)

Resumo

O uso de fitoterápico vem crescendo devido ao alto custo dos medicamentos alopáticos, à baixa incidência de efeitos colaterais e à ineficácia de alguns produtos sintéticos. Além disto, o aumento do consumo de produtos cosméticos no Brasil está em plena ascensão, tanto decorrente da conscientização das pessoas, como para a proteção solar, como para uso nos tratamentos, como acne, e melhora da aparência da pele, principalmente do rosto, como as rosáceas. O grupo contém um depósito de patente (INPI: PI018120015848) de uma composição a base de extratos vegetais e nanoesferas de sílica mesoporosa para carreamento de substâncias ativas pela pele. Mais especificamente, a composição que compreende substâncias ativas dos extratos vegetais de Stryphnodendron barbatiman (Barbatimão) e Schinus terebinthifolius Raddi (Aroeira) e nanopartículas de sílica mesoporosa como carreadores. Como os ativos apresentam atividades cicatrizante, anti-inflamatória, antibacteriana, antialérgica será de extrema importância à avaliação da citotoxicidade desta composição na pele, além da determinação das características que afetam as células da pele para futuras indicações da composição, para tanto iniciará com experimentos in vitro. Portanto, o projeto tem como objetivo avaliar o efeito da nanopartícula com extrato de Barbatimão e Aroeira em linhagens presentes na pele, como os queratinócitos, e em queratinócitos infectados com Propionibacterium acnes, bactéria causadora da acne. (AU)

Resumo

O uso de fitoterápicos padronizados com assegurada comprovação de eficácia e segurança tem apresentado resultados terapêuticos surpreendentes em diversos países. Contudo, no Brasil há deficiências na correta caracterização química das matérias-primas e escassez de ensaios farmacológicos e toxicológicos desses materiais, etapas essenciais para assegurar eficácia e segurança dos fitoterápicos. Este projeto abordará o estudo químico-farmacológico de plantas do Estado de São Paulo. Pretende-se elaborar estratégias analíticas que permitirão a padronização quali e quantitativa de um extrato vegetal, incluindo identificação de classes de sustâncias, de marcadores químicos, ou ainda dos princípios ativos. A padronização de extratos permite também a comparação da composição química de espécies pertencentes a um mesmo gênero (evitando duplicação de esforços fitoquímicos/farmacológicos), bem como o planejamento de estratégias focalizadas para o isolamento de substâncias potencialmente desconhecidas e a investigação de extratos complexos, nos casos em que o fracionamento seja inviável.Esse procedimento se iniciará com o clean-up de extratos orgânicos/infusões por meio de extração em fase sólida e/ou extração líquido-líquido, seguido pelo screening por HPLC-PDA/HPLC-MS. Quando pertinente, será também avaliada a pureza enantiomérica das substâncias detectadas, usando-se HPLC-CD-PDA. Caso necessário, proceder-se-á à transposição para escala [semi]preparativa, para o isolamento das substâncias-alvo, a fim de obter substâncias em grau de pureza e quantidades adequadas para a caracterização estrutural, construção de curvas analíticas, geração de banco de dados e execução de bioensaios.Iniciaremos com espécies de Machaerium (Fabaceae) do cerrado do estado de São Paulo, no isolamento e identificação das substâncias presentes nos extratos vegetais, acompanhada dos ensaios farmacológicos para as atividades antiúlcera, antiinflamatória/analgésica, antimutagênica e mutagênica. De acordo com a literatura, algumas espécies de Machaerium (Fabaceae) são de uso etnofarmacológico como é o caso de Machaerium hirtum, a qual é uma planta cujas cascas são utilizadas popularmente contra diarréias, tosse e câncer. É popularmente conhecida como Adolfo e bico-de-andorinha. Espécies pertencentes a este gênero produzem principalmente flavonóides como isoflavonas, pterocarpanos, neo-flavonóides, flavanonas, isoflavanas, chalconas e ainda, benzoquinonas, arilcoumarinas e cinamilfenóis. O extrato etanólico das raízes de M. aristulatum e bem como suas isoflavonas apresentaram atividade anti-giardial.As atividades biológicas envolvem a aplicação no tratamento das doenças crônicas mais prevalentes na população brasileira. Extratos serão preparados de acordo com normas farmacopêicas e avaliados sob aspectos farmacológicos e toxicológicos (em parcerias com outros grupos). Os extratos mais promissores serão padronizados de acordo com normas internacionais, com vistas a incrementar a lista das 71 espécies sugeridas pelo Ministério da Saúde para o desenvolvimento de remédios e suprir as necessidades dos planos governamentais de saúde. (AU)

Resumo

Esta proposta tem como objetivo investigar a composição química de diferentes estruturas secretoras presentes em espécies de Bignoniaceae, Malpighiaceae, Fabaceae e Rubiaceae com foco na elucidação do papel ecológico e funcional dos principais constituintes químicos secretados, prioritariamente em relação papel das glândulas florais nas interações com os polinizadores. Em Bignoniaceae serão estudados a relação do padrão de constituintes químicos da secreção produzida pelos tricomas florais e osmóforos nas espécies Zeyheria montana, Jacaranda oxyphylla, Jacaranda decurrens e Anemopaegna glaucum com as necessidades biológicas e comportamento dos respectivos grupos de polinizadores e/ou com a proteção das estruturas reprodutivas, conforme hipóteses levantadas no módulo 2 do projeto. Nas Fabaceae serão enfocados os estudos de composição química de diferentes estruturas secretoras, especialmente quanto ao papel do epitélio secretor em diferentes estádios de desenvolvimento de Copaifera langsdorfii, tricomas secretores ocos de Indigofera microcarpa, avaliação das similaridades da composição química das estruturas produtoras de taninos em Dimorphandra e Stryphnodendron e nectários florais em Erythrina, considerando-se as diferentes hipóteses apresentadas no módulo 4 do projeto. Em Malpiguiaceae serão estudadas a composição química da secreção de glândulas calicinais e foliares e o papel destes compostos nas interações, conforme hipóteses levantadas no módulo 5 do projeto. Na família Rubiaceae serão estudados a composição química de coléteres em diferentes espécies noduladas e não noduladas (Palicourea marcgravii, Psychotria sessilis, Borreria capitata, Richardia grandiflora e Tocoyena sp), tendo em vista determinar se a composição química da secreção influencia a presença de nódulos bacterianos, conforme proposto no módulo 6 do projeto. O projeto envolve atividades de campo incluindo a coleta de material vegetal para produção de extratos e de amostras das estruturas secretoras para estudos da composição química. A amostragem será feita em diferentes épocas do ano, considerando-se o período de floração de algumas das espécies a serem estudadas. A análise da composição química das secreções e extratos vegetais será feita por cromatografia em camada delgada e por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa a partir de micro-amostragem de estruturas secretoras submetidas á técnica de head-space ou de extratos vegetais. As atividades a serem desenvolvidas nesta Bolsa de Pós-doutorado permeiam quatro dentre os seis módulos do projeto, já que a análise química das estruturas secretoras é um dos focos principais do projeto temático como um todo. Os estudos de composição química das diferentes secreções são essenciais para a comprovação ou refutação das hipóteses levantadas nestes diferentes módulos de pesquisa. Assim sendo, a participação de um profissional com formação adequada na área, especialmente com domínio das técnicas de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa será fundamental no desenvolvimento das atividades previstas no projeto e de responsabilidade do pesquisador principal envolvido nestes estudos. Em adição, tal incorporação representaria uma importante contribuição na formação de recursos humanos na interface entre a biologia/ecologia com a fitoquímica, área carente de profissionais capacitados no país. Além deste pós-doutorando participar de diferentes publicações científicas, o mesmo deverá se envolver com a formação de recursos humanos em diferentes níveis, tanto em iniciação científica como de pós-graduação, como forma de ampliação de possibilidades de atuação na unidade executora do projeto, participar de eventos científicos, assim como propor e viabilizar parcerias científicas para avanços dos conhecimentos na interação biologia-química. (AU)

Resumo

A indisponibilidade comercial de substâncias químicas de referência para espécies vegetais brasileiras de interesse medicinal representa uma grande barreira para o desenvolvimento de fitoterápicos, pois inviabiliza a padronização de extratos e seu controle de qualidade. O gênero Phyllanthus, conhecido popularmente como quebra-pedras, é utilizado há anos na medicina popular e sua potencialidade como fitoterápico tem sido comprovada por pesquisas científicas. Entre as espécies de Phyllanthus contempladas na Farmacopéia Brasileira encontram-se o P. niruri e o P. tenellus, porém a inclusão do P. amarus ainda não foi efetuada, provavelmente pela falta de padrões e métodos analíticos que caracterizem esta espécie. Considerando as importantes atividades farmacológicas das lignanas presentes apenas em P. amarus o desenvolvimento analítico de um método por cromatografia líquida de alta eficiência contribuirá para a padronização de extratos vegetais ativos desta planta e seu controle de qualidade, diferenciando-a das outras espécies. Para o desenvolvimento analítico, torna-se necessário o isolamento a partir de frações enriquecidas e purificação das lignanas não disponíveis no comércio, representando uma das metas a ser atingida neste trabalho. Como forma de garantir a qualidade dos resultados obtidos na quantificação das lignanas em estudo (hipofilantina, filantina, nirtetralina e nirantina) presentes na planta e extratos vegetais de P. amarus, o método desenvolvido será devidamente validado segundo as normas da Agência de Vigilância Sanitária -ANVISA. (AU)

Resumo

O bolsista irá participar das atividades relativas aos itens 1.1, 3.1, 3.3 e 4 dos objetivos do projeto temáticos e as metodologias são descritas abaixo. Item 1.1. Para formigas cortadeiras: Os efeitos tóxicos de extratos vegetais e compostos puros serão avaliados através de bioensaios, envolvendo aplicação tópica e incorporação em dietas artificiais sólidas conforme metodologia já desenvolvida pelo grupo. Para estes ensaios as operárias serão mantidas isoladas do formigueiro. Eles serão realizados através de aplicação tópica no pronoto das formigas (contato) e da incorporação em dietas artificiais (ingestão). As operárias de saúvas serão mantidas em placas de Petri (isoladas dos formigueiros) em estufa de BOD a 25 ± 1oC, com leituras diárias de mortalidade. Item 3. Efeito tóxico de iscas para o formigueiro no laboratório e no campo. 3.1. Incorporações em iscas, microformigueiros e ninhos incipientes de laboratório serão tratados com o material pesquisado, incorporado em iscas atrativas, e a avaliação dos resultados será realizada através de determinação do consumo foliar, de medidas do jardim de fungo, da coleta do lixo e contagem de formigas mortas, além de observações gerais de comportamento. No desenvolvimento de novas iscas deverão ser utilizados compostos que em ensaios de atratividade apresentem-se ativos e a incorporação dos compostos inseticidas e fungicidas deverá ser testada em microencapsulamentos. Para a produção de iscas granuladas o grupo de pesquisa conta com uma pequena peletizadora. Os produtos que mostrarem boa atividade para os formigueiros de laboratório deverão ser testados finalmente em formigueiros de campo, através da aplicação de iscas granuladas. 3.3. Análise das formas alternativas de controle de formigas cortadeiras em canaviais Estas análises compreenderão testes de nebulização e termonebulização que serão realizados em três etapas distintas. Os produtos selecionados, dentre os já testados em laboratório pelo grupo, serão testados em sauveiros naturais em canaviais, utilizando técnica de nebulização com aquecimento e sem aquecimento. Inicialmente serão testados em ninhos incipientes (6 meses), ninhos médios (até 10 m2) e ninhos grandes (acima de 20 m2). Para cada etapa serão selecionadas 10 colônias ativas de saúva que, após um levantamento prévio da área, serão marcadas com estacas de madeira e identificadas por números. Depois, realizar-se-ão as medidas (maior comprimento e maior largura) para determinação da área do formigueiro e posterior dosagem do produto. O tamanho dos formigueiros tratados será estimado pelo método tradicional de terra solta e depois pela medida máxima entre os olheiros ativos, observados no momento da aplicação. Os ninhos serão avaliados por um período de 120 dias. Para realização dos testes serão selecionadas áreas de cultura de cana-de-açúcar, nas Usinas associadas ao Centro Tecnológico Canavieiras (CTC) em várias regiões do estado de São Paulo. O desenvolvimento deste item terá a colaboração efetiva do Centro Tecnológico Canavieiras (antiga Copersucar) colocando áreas de plantios à disposição e mão de obra especializada no controle de formigas cortadeiras. Também, terá a colaboração das empresas especializadas em termonebulização PULSFOG - Equipamentos, que atuará no desenvolvimento de um novo equipamento de nebulização sem a necessidade de aquecimento. Isto será fundamental para não alterar os produtos naturais. (AU)

Resumo

Este projeto de pesquisa tem como objetivo o estudo relativo à produção e ao controle de qualidade realizado no ciclo produtivo de um fitoterápico de uso tópico, a base de inflorescências Calendula officinalis L. - Asteraceae. Este estudo se desenvolverá em três etapas, sendo que na primeira será realizado ensaio agronômico, variando-se os tipos de adubação e cobertura morta objetivando avaliar o melhor modo de se obter a droga vegetal; na segunda será desenvolvido estudos qual e quantitativos sobre o melhor modo de se obter extratos vegetais que possam ser utilizados terapeuticamente e, na terceira etapa, será desenvolvido estudos para avaliar o melhor modo de produzir pomada a partir dos extratos obtidos. (AU)

Resumo

À mastite bovina é caracterizada por processo inflamatório da glândula mamaria e classificada de acordo com a forma de apresentação, podendo ser clínica ou subclínica. O Staphylococcus aureus destaca-se como o principal agente etiologico da mastite contagiosa e importante microorganismo na epidemiologia de doenças veiculadas por alimentos, devido a sua alta prevalência e produção de toxinas termorresistentes causadoras de gastrenterites alimentares ao homem. O tratamento da mastite bovina é realizado através da antibioticoterapia, entretanto seu uso ostensivo e inadequado proporciona resistência bacteriana a diversos princípios ativos. O agente patogênico em estudo, Staphylococcus aureus, apresenta alta resistência aos antimicrobianos disponíveis no mercado. Além da dificuldade de controlar uma enfermidade de grande impacto econômico e epidemiológico, os tratamentos atualmente disponíveis acarretam sérios prejuízos ao consumidor, à indústria e ao rebanho, devido ao risco da presença de resíduos dessas substâncias no produto final. Considerando-se a riqueza da vegetação das plantas nativas do cerrado, a existência de estudos prévios que relatam atividade antimicrobiana de alguns compostos destas plantas bem como o uso já adotado pela população, é essencial o desenvolvimento de projetos nessa perspectiva com o objetivo de gerar benefícios terapêuticos e econômicos. De acordo com a realidade apresentada justifica-se o presente estudo, que tem como objetivo avaliar o potencial de atividade antimicrobiana "in vitro" de algumas plantas nativas do cerrado brasileiro frente ao agente Staphylococcus aureus, isolados de leite mastítico, bem como de outras fontes de contaminação envolvidas na cadeia produtiva do leite consideradas fatores de risco para a ocorrência da doença. (AU)

Resumo

As doenças tropicais endêmicas continuam a afetar gravemente a Saúde Pública, no Brasil e no mundo. A dispersão geográfica e as sérias conseqüências sócio-econômicas de enfermidades, que muitas vezes chegam a ser incapacitantes, como a doença de Chagas e a leishmaniose nas suas diferentes formas, são preocupantes. Aliada a este quadro, a terapêutica tradicional requer, em geral, a onerosa internação de pacientes, com a administração parenteral de fármacos, como os antimoniais, arseniais, entre outros, quase sempre, levando às complicações em decorrência da grande toxicidade. Considerando a necessidade urgente de novas alternativas terapêuticas, extratos vegetais e seus constituintes representam fonte de moléculas-protótipo potencialmente ativas nos agentes etiológicos destas endemias. Neste contexto, em projeto anterior, comprovou-se a atividade antimalárica dos alcalóides totais da classe dos isoquinolínicos. Em triagem, posterior, frente à Leishmania (L.) chagasi (formas promastigotas e amastigotas) e Trypanosoma cruzi (formas tripomastigotas), igualmente, verificou-se o potencial antiparasitário dos alcalóides totais, o que permitiu a seleção das espécies de maior interesse, que integram o presente projeto: Annona coriacea Mart. e A. crassiflora Mart encontradas na flora do Estado de São Paulo. Em ensaio recente, ainda inédito, outra representante do gênero Annona, A.squamosa L. demonstrou atividade antileishmania promissora, vindo a integrar,igualmente, esta proposta, a qual tem por objetivo a separação e o isolamento dos alcalóides responsáveis pelas atividades antiprotozoárias verificadas. Em paralelo, será realizada a avaliação da citotoxicidade em células RAW 264.7 (macrófagos de murinos), permitindo a determinação do Indice de Seletividade. Visando averiguar os possíveis mecanismos de ação, serão efetuados estudos ultraestruturais dos compostos mais ativos. (AU)

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A doença de Chagas é um problema de saúde pública, com dados preocupantes referentes ao número de pessoas contaminadas e daquelas que ainda permanecem expostas ao risco de infecção. A dificuldade do combate a Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença, está intimamente relacionada às interações existentes entre o parasito e o hospedeiro, sendo que até o momento, nenhum medicamento ou substância tem demonstrado real eficácia ao combate ao parasito. Nesse sentido, a triagem de extratos de diferentes polaridades, derivados de plantas pertencentes à flora brasileira, pode resultar em um caminho empírico promissor para o encontro de uma nova substância capaz de atuar sobre o parasito, independentemente da fase da doença de Chagas. Assim, nossa proposta de trabalho é avaliar o potencial terapêutico dos triterpenos ácido ursólico e seu sal potássico, ácido oleanóico, além da mistura ácido ursólico e oleanóico isolada do extrato vegetal, obtido da espécie Miconia albicans, uma vez que essas substâncias já demonstraram atividade sobre as formas tripomastigotas e amastigotas intracelulares de T. cruzi, em trabalho preliminar realizado por nosso grupo de pesquisa. Para isso, utilizaremos no presente trabalho metodologia in vivo (para fase aguda e fase crônica), a fim de avaliarmos o potencial terapêutico dessas substâncias, bem como a avaliação de alterações histopatológicas determinadas por diferentes formas de tratamento empregadas. (AU)

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O presente trabalho de pesquisa terá por objetivo avaliar em laboratório e casa-de-vegetação o efeito de extratos de plantas inseticidas e genótipos resistentes de tomateiro no controle de B. tabaci biótipo B. O trabalho constará de duas etapas: na primeira, seis genótipos de tomateiro resistentes (LA0716, LA1584, LA371, PI127826, PI134417, PI134418) e um genótipo suscetível (Santa Clara) serão avaliados quanto a não-preferência para oviposição e não-preferência para alimentação, a fim de selecionar três genótipos com os maiores níveis de resistência. Na segunda etapa, a oviposição e biologia do inseto serão novamente avaliados nos três genótipos selecionados, juntamente com o Santa Clara; porém nesta fase, extratos aquosos de Trichilia pallida (folhas e ramos) e Azadirachta indica (sementes) serão pulverizados sobre populações de insetos provenientes de cada um dos genótipos, visando constatar a ocorrência ou não de interação das duas táticas de controle da mosca-branca. (AU)

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Streptococcus mutans desempenha importante papel na formação da cárie dental através da síntese de glucanas que favorecem a adesão bacteriana na superfície dos dentes, da produção de ácidos orgânicos pela metabolização de carboidratos que provoca desmineralização do esmalte dental e da capacidade de proliferar em baixo pH. A própolis é um produto natural que pode prevenir o processo cariogênico. No Brasil, a espécie vegetal Baccharis dracunculifolia é a principal matéria-prima utilizada por abelhas para a produção da própolis verde. Por outro lado, até o momento não foi demonstrando se B. dracunculifolia possui um efeito anticariogênico equivalente ao da própolis verde. No presente projeto, propomos um estudo comparativo dos efeitos de extratos de própolis verde e B. dracunculifolia sobre a síntese de glucanas, o potencial acidogênico bacteriano e o crescimento celular de S. mutans. A confirmação de atividade biológica do extrato vegetal poderá credenciar o seu emprego em formulações farmacêuticas de uso odontológico de maneira similar à própolis verde. (AU)

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O trabalho propõe a avaliação da atividade anti-ofídica dos extratos brutos, frações e princípios ativos isolados das plantas Mikania glomerata, Casearia sylvestris e Mandevilla velutina contra os venenos de Bothrops jararacussu e Crotalus durissus terrificus. Neste estudo serão avaliadas diversas atividades tóxicas, farmacológicas e histopatológicas induzidas por estes venenos, e suas toxinas isoladas, na presença e ausência de extratos e/ou princípios ativos vegetais. Os ensaios farmacológicos (toxicidade, edema, algesia e analgesia) e histopatológicos (microscopia óptica e eletrônica) serão mais estudados para avaliar melhor a atividade anti-ofídica destes extratos. Além disso, será utilizada cromatografia por afinidade para o isolamento de inibidores de fosfolipases A2. De igual forma, efetuar-se-á a introdução destas espécies vegetais em um banco de germoplasma, garantindo que ao obter-se resultados promissores, haja matéria-prima com diversidade para estudos de manejo e produção da planta de potencial fitoterápico. (AU)

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O objetivo do projeto é o desenvolvimento de extratos vegetais padronizados de plantas medicinais nacionais para servir de insumos para fitoterápicos e cosméticos, e a sua utilização em vários tipos de veículos coloidais e suas possíveis formas farmacêuticas. Extratos padronizados serão definidos como aqueles cujos componentes vegetais possuam origens definidas e dentro de padrões de qualidade exigidos pela ANVISA, cuja manipulação industrial e laboratorial siga Procedimentos Operacionais definidos conforme normas aceitas pelo Ministério da Saúde, e cuja padronização química seja estabelecida procurando marcadores biológicos/princípios ativos se conhecidos. Numa primeira etapa serão estudadas uma série de cinco plantas da flora nacional: Andiroba (Carapa guayanensis); Marcela (Achyrocline satureioides); Pau Ferro (Caesalpinea férrea); Carajirú (Arrabidaea chica); Graviola (Annona muricata); Melão de São Caetano (Momordica charantia). Na FASE I será feita a caracterização fitoquímica qualitativa dos extratos de cada uma das espécies e ensaios de formulação com esses extratos em veículos coloidais (cremes, géis, loções, xaropes, etc ... ) O trabalho será efetuado na própria empresa, em laboratório de fitoquímica do IQ-UNICAMP e os ensaios toxicológicos preliminares, no CPQBA - UNICAMP (AU)

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A clonagem de genes em vetores de expressão possibilita a produção de enzimas de organismos patogênicos em organismo heterólogo. Considerando organismos geneticamente modificados e não infectantes podemos produzir proteínas em larga escala. A produção de massa de proteínas possibilita desde a cristalização até testes avançados de triagem de novos fármacos. A enzima arginase é responsável pela conversão do aminoácido L-arginina em ornitina e uréia. Em Leishmania, a enzima arginase desempenha um papel crítico na produção de ornitina que é a molécula precursora de poliaminas (espermina, espermidina). A produção de poliaminas é essencial para o crescimento e multiplicação de Leishmania. O nocaute do gene da enzima arginase de Leishmania demonstrou que a enzima pode ser utilizada como alvo terapêutico. O gene da arginase de Leishmania (Leishmania) amazonensis foi clonado em vetor de expressão heterólogo e em seguida a enzima foi produzida e purificada em larga escala. Extratos vegetais de diversas espécies do Cerrado Tocantinense foram testados e apresentaram inibição da arginase de Leishmania. O sucesso da inibição da arginase in vitro naturalmente conduz aos ensaios de avaliação em culturas de promastigota e em culturas de amastigotas, além da avaliação do potencial terapêutico em modelo animal. Assim este projeto propõe isolar, caracterizar e testar inibidores seletivos de arginase de L. (L.) amazonensis em cultura e em modelo animal de infecção por Leishmania. Além das moléculas obtidas de vegetais também testaremos protótipos de inibidores sintéticos que foram planejados para inibirem a enzima arginase. (AU)

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A necessidade da inovação tecnológica de novos ativos naturais no arsenal farmacêutico e/ou cosmético é absoluta. Com o desenvolvimento tecnológico dos produtos farmacêuticos alcançado nos últimos anos, se faz necessária a busca por novos compostos com facilidade de aquisição, que apresente estabilidade nas formulações e com atividades biológicas diversas incluindo principalmente a atividade antimicrobiana decorrente do aparecimento de microrganismos resistentes. Estudos de prospecção e inovação de substâncias com atividade biológica a partir de plantas são fundamentais devido à grande biodiversidade de nosso país. Tal interesse é diretamente relacionado com o uso popular descrito para o Syzygium cumini (L.) Skeels. Este vegetal é popularmente conhecido, no Brasil, como jambolão, jamelão ou azeitona-roxa. S. cumini, é uma árvore nativa dos trópicos, particularmente da índia, bem como da Tailândia, Filipinas e Madagascar. No Brasil é encontrado em diversos estados das regiões Sudeste, Nordeste e Norte. O presente trabalho tem por objetivo preparar o extrato do fruto de S. cumini, avaliar a atividade antimicrobiana como desenvolver o sabonete com o respectivo extrato. Com estes compostos ou ativos, pretende-se posteriormente desenvolver outros produtos que possam ser utilizados como anti-sépticos ou conservantes de preparações farmacêuticas ou cosméticas. (AU)

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De um modo geral, o projeto visa estudar os efeitos de extratos de determinadas plantas na foto-proteção de material genético e no reparo de DNA de células humanas. Resultados preliminares indicaram que extrato aquoso da espécie Phyllanthus orbicularis reduz o impacto de irradiação com luz UVB em células humanas proficientes em reparo de DNA, mas não em células deficientes. Estes dados Indicam que o extrato é capaz de ativar o sistema de reparo celular, o que será estudado neste projeto. Também pretendemos verificar o efeito foto-protetor de extratos celulares das espécies P. orbicularis e Cymbopogon citratus. Este trabalho deverá ser focado para ação direta em DNA plasmidial submetido à irradiação UVA e luz solar, na expectativa que se distingue eventuais atividades anti-oxidante e fotoprotetoras. Devida a efetiva experiência do Dr. Lamar na área de Mutagênese, este deverá também participar das atividades acadêmicas do ... (AU)

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A necessidade da inovação tecnológica de novos ativos naturais no arsenal farmacêutico e/ou cosmético é absoluta. A implementação de estratégias brasileiras de utilização racional e otimizada da biodiversidade é crucial para superar as fragilidades e lacunas da cadeia inovativa e produtiva farmacêutica, propondo mecanismos operacionais capazes de viabilizar a transformação de resultados científicos promissores em resultados econômicos efetivos com impactos socioeconômicos. Estudos de prospecção para o desenvolvimento de inovações como as de substâncias com atividade biológica a partir de plantas são fundamentais devido à grande biodiversidade de nosso país. A busca por novos compostos com facilidade de aquisição, não tóxicos, que apresente estabilidade nas formulações e com atividades biológicas diversas incluindo principalmente a atividade antimicrobiana é necessária principalmente decorrente do aparecimento de micro-organismos resistentes. Tal interesse é diretamente relacionado com o uso popular descrito para a planta Syzygium cumini (L.) Skeels. Este vegetal é popularmente conhecido, no Brasil, como jambolão, jamelão ou azeitona-roxa. Esta planta é encontrada em diversas regiões de nosso país o que retrata sua facilidade de aquisição. O presente trabalho tem por objetivo preparar o extrato do fruto de S. cumini, realizar o controle microbiológico do extrato, desenvolver a formulação e novamente realizar o controle microbiológico da formulação. Com estes compostos ou ativos, pretende-se posteriormente desenvolver outros produtos que possam ser utilizados como anti-sépticos ou conservantes de preparações farmacêuticas ou cosméticas. (AU)

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Agregar novas metodologias ao controle biológico e ao manejo integrado de pragas (MIP) são requisitos básicos para o desenvolvimento de uma agricultura mais sustentável. Por isso, o uso de extratos vegetais e inimigos naturais, associados ou não, apresentam crescente demanda para controle dos níveis populacionais de insetos pragas. No entanto, pesquisas atuais vêm refutando a ideia de que compostos naturais com propriedades biopesticidas sejam mais seguros que compostos sintéticos sobre espécies de insetos não-alvo como os inimigos naturais, dentre eles os crisopídeos. Por serem predadores na fase de larva com ampla variedade de presas, e alto potencial reprodutivo na fase adulta, os crisopídeos, dentre estes Ceraeochrysa claveri, são excelentes modelos biológicos para análises de toxicidade e viabilidade de seu uso associado com compostos naturais em culturas que priorizam a manutenção da biodiversidade. O conhecimento da resposta celular de três órgãos vitais (intestino médio, testículos e ovários) para a manutenção da espécie C. claveri frente à exposição ao biopesticida óleo de nim, assim como a avaliação da capacidade de renovação do epitélio do mesêntero e sua ligação ao processo reprodutivo do inseto exposto ao biopesticida serão resultados importantes e inéditos que trarão contribuições significativas na detecção e caracterização de efeitos sub-letais que prejudicariam a continuidade de um controle biológico natural em um agroecossistema onde se faz uso do óleo de nim, podendo comprometer a perpetuação da espécie não alvo, devido a alterações em seu potencial reprodutivo. (AU)

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Nas últimas décadas tem aumentado bastante os mecanismos de combate a alergias como a asma de fundo alérgico. Apesar disto, tem aumentado as taxas de hospitalizações e mortalidade de pacientes asmáticos. Desta forma, novos mecanismos que possam tratar ou evitar estas moléstias são de grande importância. Está bem estabelecido que a ativação de mastócitos por antígenos específicos inicia processos alérgicos conhecidos como reações de hipersensibilidade do tipo I, e assim sendo, o controle da secreção destas células pode também controlar as moléstias como a asma alérgica; ocorre, porém, que os medicamentos conhecidos que tem esta atividade não são suficientemente eficazes, utilizando-se de experiências anteriores, este projeto objetiva estudar a atividade de estratos de plantas popularmente utilizadas como antiasmático e/ou antipluriginoso, sobre a secreção de mastócitos. (AU)

Resumo

Formulações lipídicas foram desenvolvidas para melhorar a instabilidade química e aumentar a absorção de compostos bioativos de cravo da India. Este projeto avaliará a eficácia destas formulações na absorção intestinal utilizando o model de células CaCo-2 (AU)

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O atual aumento na competitividade nas diferentes cadeias agroindustriais, tanto no mercado nacional quanto internacional, tem forçado a indústria de alimentos a desenvolver produtos de melhor qualidade no tocante da segurança alimentar, rastreabilidade, qualidade sensorial e nutricional. Neste ínterim, o uso de aditivos e flavorizantes é essencial na conservação das propriedades químicas, físico-químicas e sensoriais do produto. Assim, o uso de extratos vegetais e de frutas ricos em compostos fenólicos como aditivos e flavorizantes de origem natural na indústria de laticínio é uma atual vertente do mercado. Entretanto, pouco se sabe a respeito da interação destes compostos fenólicos e proteínas do soro do leite e sua influência na atividade antioxidante do produto. O leite e os seus derivados são produtos em geral sensíveis à luz, e as reações foto-iniciadas afetam não somente a qualidade sensorial, mas também levam a formação de substâncias tóxicas e a degradação de importantes nutrientes. Assim, o presente projeto visa o estudo das interações moleculares entre compostos fenólicos, antioxidantes, e proteínas do soro do leite e avaliar o efeito sinérgico ou antagônico destas interações na proteção antioxidante do leite e derivados frente aos efeitos deletérios da exposição do produto à radiação luminosa. (AU)

Resumo

O atual aumento na competitividade nas diferentes cadeias agroindustriais, tanto no mercado nacional quanto internacional, tem forçado a indústria de alimentos a desenvolver produtos de melhor qualidade no tocante da segurança alimentar, rastreabilidade, qualidade sensorial e nutricional. Neste ínterim, o uso de aditivos e flavorizantes é essencial na conservação das propriedades químicas, físico-químicas e sensoriais do produto. Assim, o uso de extratos vegetais e de frutas ricos em compostos fenólicos como aditivos e flavorizantes de origem natural na indústria de laticínio é uma atual vertente do mercado. Entretanto, pouco se sabe a respeito da interação destes compostos fenólicos e proteínas do soro do leite e sua influência na atividade antioxidante do produto. O leite e os seus derivados são produtos em geral sensíveis à luz, e as reações foto-iniciadas afetam não somente a qualidade sensorial, mas também levam a formação de substâncias tóxicas e a degradação de importantes nutrientes. Assim, o presente projeto visa o estudo das interações moleculares entre compostos fenólicos, antioxidantes, e proteínas do soro do leite e avaliar o efeito sinérgico ou antagônico destas interações na proteção antioxidante do leite e derivados frente aos efeitos deletérios da exposição do produto à radiação luminosa. (AU)

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O atual aumento na competitividade nas diferentes cadeias agroindustriais, tanto no mercado nacional quanto internacional, tem forçado a indústria de alimentos a desenvolver produtos de melhor qualidade no tocante da segurança alimentar, rastreabilidade, qualidade sensorial e nutricional. Neste ínterim, o uso de aditivos e flavorizantes é essencial na conservação das propriedades químicas, físico-químicas e sensoriais do produto. Assim, o uso de extratos vegetais e de frutas ricos em compostos fenólicos como aditivos e flavorizantes de origem natural na indústria de laticínio é uma atual vertente do mercado. Entretanto, pouco se sabe a respeito da interação destes compostos fenólicos e proteínas do soro do leite e sua influência na atividade antioxidante do produto. O leite e os seus derivados são produtos em geral sensíveis à luz, e as reações foto-iniciadas afetam não somente a qualidade sensorial, mas também levam a formação de substâncias tóxicas e a degradação de importantes nutrientes. Assim, o presente projeto visa o estudo das interações moleculares entre compostos fenólicos, antioxidantes, e proteínas do soro do leite e avaliar o efeito sinérgico ou antagônico destas interações na proteção antioxidante do leite e derivados frente aos efeitos deletérios da exposição do produto à radiação luminosa. (AU)

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O presente projeto propõe investigar o potencial do extrato de H. aphrodisiaca em contrabalancear as alterações morfológicas normalmente observadas em testículo de rato Wistar submetido a estresse oxidativo por Cloreto de Cádmio. Juntamente com os ensaios propostos no projeto principal, as avaliações morfológicas irão contribuir significativamente para elucidar a atividade antioxidante deste extrato vegetal, assim como identificar seus mecanismos de atuação. Neste projeto de treinamento técnico, o aluno selecionado terá a oportunidade de entrar em contato com técnicas rotineiras de microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão (MET), sendo estas técnicas amplamente utilizadas por nossa equipe de trabalho. O aluno irá acompanhar o processamento de material biológico para microscopia de luz desde a coleta do mesmo, passando por seu processamento, inclusão em resina e parafina, microtomia, montagem de lâminas, coloração, captura de imagens, análises esteriológicas e estatísticas. O aluno será também exposto a técnicas rotineiras de microscopia eletrônica de transmissão, desde o processamento padrão para esta técnica, como ultramicrotomia e montagem de telinhas, até a operação do MET. Durante este processo de treinamento, o aluno será incentivado a buscar na literatura científica material que o auxilie a compreender e discutir os resultados observados, de forma que adquira experiência para colaborar na elaboração dos artigos científicos provenientes deste estudo. (AU)

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Há grande demanda por alimentos saudáveis, fáceis de preparar e com vida de prateleira prolongada. No entanto, os procedimentos para limitar a multiplicação de patógenos nesses alimentos podem ser restritivos somente para alguns tipos de microrganismos, podendo favorecer a prevalência de bactérias anaeróbias e psicrotróficas, como Listeria monocytogenes. A aplicação de múltiplos fatores antimicrobianos tem demonstrado ser mais eficaz na conservação de alimentos, promovendo uma barreira adicional contra patógenos resistentes a tratamentos isolados. Nesse trabalho, será avaliado o efeito inibitório do extrato de alecrim pimenta (Lippia sidoides Cham.) e de bacteriocinas produzidas por isolados Carnobacterium piscicola frente a L. monocytogenes em caldo de peptona de peixe, caldo de surubim defumado e homogeneizado de surubim defumado armazenados a 5°C. Resultados preliminares obtidos em nosso laboratório demonstraram que o extrato hidroalcoólico de alecrim pimenta apresentou efeito inibitório frente a L. monocytogenes a 37°C. O extrato hidroalcoólico demonstrou efeito sinérgico com a temperatura de refrigeração (5ºC) na inibição de L. monocytogenes. Neste projeto, o extrato hidroalcoólico de alecrim pimenta será testado sozinho ou em associação com as bacteriocinas semipurificadas de isolados de C. piscicola bacteriocinogênicos em sistemas modelo (caldo de peptona de peixe, caldo de surubim e homogeneizado de surubim), com o objetivo de avaliar o efeito combinado do uso de extrato vegetal e de bacteriocinas na conservação e garantia da inocuidade de pescados. (AU)

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Com o crescimento mundial do número de indivíduos obesos, inclusive entre a população de baixa renda, se faz necessário identificar novos agentes capazes de atuarem na redução de peso ou na melhora dos transtornos secundários relacionados à obesidade. Existem evidências epidemiológicas que demonstram a importância de dietas ricas em frutas, vegetais, grãos e leguminosas na proteção contra certos tipos de câncer, doenças cardiovasculares e outras doenças crônicas não transmissíveis. Estes efeitos podem estar relacionados à presença de compostos bioativos, como por exemplo, compostos fenólicos e organossulfurados, fitoestrógenos, carotenóides e terpenóides, que atuam de forma sinérgica. A comercialização de suplementos alimentares contendo extratos vegetais que estimulam a redução de peso e o recente interesse despertado pela espécie Hoodia gordonii, como inibidor do apetite, são alguns exemplos que ilustram a importância de espécies utilizadas como alimento no combate à obesidade. Este trabalho tem como principal objetivo a identificação de substâncias ativas, a partir de fontes vegetais utilizadas como alimento, que possam contribuir para o/ ou prevenção da obesidade, a fim de avaliar a plausibilidade biológica da ação protetora frente à obesidade e suas consequências. (AU)

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Para os estudos clínicos e de estabilidade, é necessária a caracterização química dos extratos vegetais e a obtenção de marcadores, sendo esta etapa de relevância para a execução destes estudos. Estes padrões, por sua vez, devem ser obtidos e certificados quanto à sua identidade e pureza e alguns podem servir de inspiração para os químicos sintéticos e medicinais. Uma parte dessas abordagens tem sido realizada dentro do programa BioProspecta, contudo, a falta de estudos de metabolismo, absorção e distribuição de ativos naturais ainda é um dos grandes gargalos na pesquisa do país e da implementação de algumas fases de estudos pré-clínicos. Dentro deste cenário, o objetivo desta proposta é o estabelecimento de uma plataforma de trabalho, englobando 4 grandes grupos, sendo a primeira colaborativa com os grupos componentes do Bioprospecta e de nossos pesquisadores na busca de novos produtos bioativos. A segunda estrutura visa o desenvolvimento de reações biomiméticas para obtenção de derivados estruturalmente semelhantes aos produzidos pelo sistema microssomal humano. O terceiro pilar visa os estudos de interpretação e aplicação das reações de decomposição em fase gasosa de micromoléculas ionizadas por ESI. Finalmente o quarto pilar busca aplicar todas essas informações em modelos in vivo utilizando um reduzido número de animais e permitindo uma interpretação do metabolismo de produtos naturais, essenciais nas fases iniciais dos estudos pré-clínicos. (AU)

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A aplicação de ingredientes naturais em alimentos, fármacos e cosméticos tem se tornado uma tendência mundial e despertado o interesse da comunidade científica e de indústrias quanto à investigação fitoquímica e aplicação tecnológica de extratos vegetais, sobretudo aqueles ainda subexplorados. Considerando a biodiversidade brasileira, seu potencial de aproveitamento e a necessidade de um modelo de desenvolvimento econômico sustentável, pesquisas envolvendo produtos genuinamente nacionais assumem significativa importância. Nesse sentido, destacam-se as frutas nativas que na maioria das vezes estão restritas às comunidades onde a disseminação ocorre espontaneamente. O consumo regular de frutas, devido principalmente aos seus compostos fenólicos e atividade antioxidante, tem sido relacionado à menor incidência de patologias desencadeadas pelo estresse oxidativo como câncer, diabetes e enfermidades cardiovasculares. A crescente preocupação com o uso de antioxidantes sintéticos em alimentos também sugere a necessidade de estudos sobre a composição química e atividade antioxidante de espécies vegetais. Portanto, o presente trabalho tem por objetivo caracterizar e identificar compostos fenólicos bioativos, especialmente substâncias antioxidantes, de frutíferas nativas brasileiras (polpa, casca, semente de frutos e folhas) ampliando as informações disponíveis sobre sua composição química, na expectativa de que resultados propiciem benefícios à sociedade no que se refere às fontes de antioxidantes naturais e preservação da flora nativa. (AU)

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O programa de atividades descrito abaixo compreende atividades rotineiras que exigem trabalho cuidadoso por técnicos de nível superior. As atividades visam subsidiar as três metas principais do projeto "CONSERVAÇÃO E USO SUSTENTÁVEL DA DIVERSIDADE DO CERRADO E DA MATA ATLÂNTICA: DIVERSIDADE QUÍMICA E BIO PROSPECÇÃO DE FÁRMACOS - FASE II", financiado pela FAPESP e em andamento nos laboratórios de Produtos Naturais do Instituto de Química da UNESP/Araraquara e da Seção de Fisiologia e Bioquímica do Instituto de Botânica/SMA-SP: (1) Busca de produtos naturais bioativos em espécies vegetais de Cerrado e da Mata Atlântica do Estado de São Paulo; (2) seleção de extratos vegetais através de bioensaios para a detecção de substâncias com potencial anticancerígeno, antifúngico, anticolinesterásico, antioxidante e antimalárico; (3) cultivo de plantas selecionadas visando estudos fisiológicos e químicos. (AU)

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O programa de atividades compreende atividades rotineiras que exigem trabalho cuidadoso por tecnicos de nível superior. As atividades visam subsidiar as três metas principais do projeto "CONSERVAÇÃO E USO SUSTENTÁVEL DA DIVERSIDADE DO CERRADO E DA MATA ATLÂNTICA: DIVERSIDADE QUÍMICA E BIO PROSPECÇÃO DE FÁRMACOS - FASE II", financiado pela FAPESP e em andamento nos laboratórios de Produtos Naturais do Instituto de Química da UNESP/Araraquara e da Seção de Fisiologia e Bioquímica de Plantas do Instituto de Botânica/SMA-SP: (1) Busca de produtos naturais bioativos em espécies vegetais de Cerrado e Mata Atlântica do Estado de São Paulo; (2) seleção de extrator vegetais através de bioensaios para detecção de substâncias com potencial anticancerígeno, antifúngico, anticolinesterásico, antioxidante e antimalárico; (3) cultivo de plantas selecionadas visando estudos fisiológicos e químicos. (AU)

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O trabalho propõe a avaliação da atividade antiofídica dos extratos brutos, frações e princípios ativos isolados das plantas Mikania glomerata, Casearia sylvestris e Mandevilla velutina contra os venenos de Bothrops jararacussu e Crotalus durissus terrificus. Neste estudo serão avaliadas diversas atividades tóxicas, farmacológicas e histopatológicas induzidas por estes venenos, e suas toxinas isoladas, na presença e ausência de extratos e/ou princípios ativos vegetais. Os ensaios farmacológicos (toxicidade, edema, algesia e analgesia) e histopatológicos (microscopia óptica e eletrônica) serão mais estudados para avaliar melhor a atividade antiofídica destes extratos. Além disso, será utilizada cromatografia por afinidade para o isolamento de inibidores de fosfolipases A2. De igual forma, efetuar-se-á a introdução destas espécies vegetais em um banco de germoplasma, garantindo que ao obter-se resultados promissores, haja matéria-prima com diversidade para estudos de manejo e produção da planta de potencial fitoterápico. (AU)

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A busca pela preservação dos recursos naturais vem atualmente conscientizando a sociedade sobre a importância dos alimentos, exigindo produtos com o uso mínimo de inseticidas que são prejudiciais à saúde, e para aumentar a oferta de alimentos seguros a esta população, vemos crescer o uso da agricultura orgânica e do manejo integrado de pragas. Na busca por insetos que possam ser utilizados no controle biológico, sendo esta uma importante ferramenta na agricultura orgânica e manejo integrado de pragas, os crisopídeos vem se mostrando um forte agente controlador, uma vez que suas larvas são predadoras de diversos ovos e larvas de insetos pragas de diferentes culturas comerciais. Com o propósito de avaliar o efeito do óleo de nim, um extrato vegetal com propriedades bioinseticidas, sobre os crisopídeos, ovos de Diatraea saccharalis serão tratados com óleo de nim em três diferentes concentrações e oferecidos como alimento a larvas de Ceraeochrysa claveri, avaliando deste modo o efeito da ingestão do óleo de nim na fase larval sobre as células epiteliais do intestino médio de larva terceiro ínstar, pupa e adulto de C. claveri. Através do conhecimento da morfologia e ultra-estrutura das células do intestino médio e do efeito da ingestão do óleo de nim sobre este órgão, poderemos no futuro informar a viabilidade do uso associado do óleo de nim e de crisopídeos em culturas que priorizam a manutenção da diversidade e manejo integrado das pragas. (AU)

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O projeto visa a busca de produtos bioativos em espécies vegetais de ocorrência no Estado de São Paulo, especialmente nas áreas remanescentes do Cerrado e da Mata Atlântica. A seleção de extratos vegetais será realizada através de bioensaios visando a deteção de substâncias com potencial anticancerígeno, antioxidante, antifúngico e antimalárico visando o estabelecimento de um modelo para preservação, estudo e exploração racional da flora remanescente do Estado de São Paulo. Para espécies selecionadas na triagem serão desenvolvidas culturas in vitro visando a preservação do germoplasma como fonte renovável. Tecidos desdiferenciados serão utilizados como fonte alternativa de produtos ativos e para estudos de biossíntese e de regulação dos principais metabólitos secundários. (AU)

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Ilex paraguariensis (chá mate) é amplamente usado na América latina sob a forma de infusão aquosa. Dentre as propriedades atribuídas a esta planta encontra-se a atividade antioxidante que sugere um papel importante desta droga na prevenção e tratamento de doenças associadas ao estresse oxidativo como a aterosclerose, fotocarcinogênese e foto envelhecimento, entre outras. O uso mais comum do chá mate como alimento é na forma de infusão aquosa. Poucos estudos relataram o emprego de extrato alcoólico ou hidroalcoólico padronizado de mate como complemento alimentar, ou na prevenção de lesões cutâneas promovidas pela radiação solar. Sabe-se ainda que uma maneira de aumentar a biodisponibilidade de antioxidantes em extratos vegetais é promover a sua hidrólise visando à liberação dos compostos ativos, conforme demonstrado para outras plantas. O objetivo deste trabalho é estudar a atividade antioxidante do extrato hidroalcoólico de Ilex paraguariensis antes e após a hidrólise, proceder à análise fitoquímica destes extratos, estudar a biodisponibilidade relativa dos compostos antioxidantes bem como sua distribuição na pele, em animais de experimentação. (AU)

Resumo

A Achyrocline satureioides (D.C.) é uma planta aromática, cujo óleo essencial é rico em compostos fenólicos aos quais são atribuídas propriedades antioxidantes. Esta espécie é nativa em vários países da América Latina, incluindo o Brasil. Neste trabalho, a extração supercrítica será empregada para obtenção de extratos de A. satureioides. Serão determinadas três isotermas (30, 45, 60ºC) de rendimento global (IRG), para pressões entre 100 e 350 bar usando CO2 e CO2 + etanol (5%, vol.). A partir das IRG será determinada a pressão de inversão, ou seja, o ponto de condensação retrógrada. A cinética de extração será determinada para a condição de temperatura e pressão que maximize o rendimento global. Extratos de A. satureioides serão também obtidos por hidrodestilação e por extração com etanol. As extrações com etanol como co-solvente também serão conduzidas a 30, 45 e 60ºC; a cinética de extração será estudada nas três temperaturas. A composição química dos óleos voláteis será determinada por cromatografia gasosa com detector FID. Compostos fenólicos e flavonóides serão avaliados tanto quantitativa, quanto qualitativamente (cromatografia em camada delgada). Serão realizados estudos cinéticos para investigação da influência da geometria do leito e da vazão de solvente a fim de realizar uma estimativa preliminar dos custos de manufatura para o processo de extração supercrítica. O equilíbrio de fases do sistema também será avaliado para o sistema extrato de macela +CO2. (AU)

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A pesquisa de bioprospecção do projeto Temático "Conservation and Sustainable Use of the Plant Diversity from Cerrado and Atlantic Forest: Chemical Diversity and Prospection for Potential Drugs Phase II," (Processo no 03/02176-7) Biota - FAPESP conta com um banco de extratos vegetais preparado a partir de cerca de 1700 espécies. Vários extratos bioativos foram selecionados para continuação do estudo fitoquímico bio-guiado objetivando o isolamento de substâncias bioativas de interesse farmacológico. Dentre os extratos selecionados, os obtidos de Brosimum glaziovii (Moraceae) e Kielmeyera variabilis (Clusiaseae) mostraram-se promissores devido à atividade antifúngica nas cepas Cladosporium cladosporioides e C. sphaerospermum. Adicionalmente, a avaliação da inibição in vitro de b-hematina e análise dos adultos formados entre heme-metabólito secundários via CLAE, com estes extratos, demonstraram forte complexação, indicativo da presença de substâncias com potencial antimalárico nos extratos testados. Esse resultado é o primeiro indício da presença de metabólitos especiais antimaláricos e deverão ser avaliadas nos ensaios com cepas de Plasmodium falciparum para confirmação da atividade antimalárica. O projeto em pauta tem como objetivo o isolamento de protótipos antimaláricos e o mapeamento de substancias capazes de complexarem com hematina em matrizes complexas para estabelecimento de metodologia de desreplicação de antimaláricos em extratos brutos. (AU)

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O projeto será desenvolvido na FCAV-UNESP, com o objetivo de avaliar o efeito da interação entre resistência de cultivares de repolho, inseticidas vegetais e Trichogramma pretiosum no manejo de Plutella xylostella. Para tanto, inicialmente será avaliada a biologia de P. xylostella nas cultivares Granat Roxo, Midorí, Scarlet, Roxo Precoce e Chato de Quintal em laboratório. No segundo experimento será avaliada a toxicidade dos produtos químicos Lufenuron e Deltametrina e, dos de origem vegetal Azadiractina e Extrato pirolhenhoso, através da adequação das doses letais (DL) para cada produto, em relação à praga em questão, criada em couve cv. Manteiga. O terceiro experimento será realizado com os mesmos produtos testados no segundo, no entanto, serão avaliados os efeitos dos mesmos sobre o controlador biológico Trichogramma pretiosum, seguindo-se os padrões internacionais recomendados pela IOBC/WPRS (1988, 1992). No quarto experimento será avaliada a associação dos métodos testados nos três primeiros experimentos, utilizando-se duas cultivares de repolho classificadas como moderadamente resistentes, no primeiro experimento e dois produtos, um químico e um de origem vegetal, nas dosagens indicadas no terceiro experimento como seletivas ao T. pretiosum e que proporcionem mortalidade de no máximo 50% para P. xylostella. (AU)

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Este projeto propõe dar continuidade ao estudo integrado químico-farmacológico de espécies usadas como medicinais encontradas no Bioma Cerrado do Estado de São Paulo e do Tocantins. Investigaremos a composição química de espécies vegetais aplicando técnicas que permitam uma análise quali e quantitativa rápida e eficaz, tais como o uso de uso de cartuchos de extração em fase sólida seguido por análises por HPLC. Nesse caso, serão investigadas espécies dos gêneros Neea e Guapira (Nyctaginaceae). Pretende-se desenvolver metodologias que permitam avaliar quali e quantitativamente a presença de compostos opticamente ativos usando HPLC acoplado com detectores de arranjo de fotodiiodos e de dicroísmo circular. Numa etapa inicial serão investigadas as catequínas (de menor complexidade estrutural quando comparadas com outros metabólitos secundários), o que servirá como base para aprofundar os conhecimentos sobre HPLC quiral. Dentre as espécies vegetais, optamos pelas do gênero Byrsonima, devido ao conjunto de dados químicos e biológicos disponíveis até o momento. Assim, a investigação da quiralidade de moléculas naturais se constituirá em um importante diferencial em relação às abordagens que tem sido explorado em nosso e em outros grupos de pesquisas. (AU)

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O objetivo desse projeto de pesquisa é investigar a influência do processo de obtenção, condições de armazenagem e propriedades físico-químicas sobre a estabilidade de extratos secos padronizados de plantas medicinais. Esse conhecimento pode ser útil durante o desenvolvimento de processos de produção, permitindo a seleção de condições operacionais que levem a um produto estável, ou seja com propriedades físico-químicas adequadas para a manutenção de sua qualidade por todo o período necessário para sua comercialização e armazenagem. Os extratos serão caracterizados em relação à composição (presença de açúcares, ácidos orgânicos; lipídeos, resinas); determinação da temperatura de transição vítrea, da atividade de água, temperatura de "aderência" (sticky point temperature), determinação das isotermas de dessorção e adsorção e propriedades de adjuvantes de secagem. Finalmente, os extratos secos padronizados de plantas medicinais serão colocados em câmara climática visando avaliar a variação de propriedades físicas e químicas em função do período e condições de armazenagem. Os resultados dos testes de estabilidade serão correlacionados com os parâmetros físico-químicos determinados, visando o estabelecimento de uma correlação entre as propriedades intrínsecas do extrato original e a estabilidade do produto. Extratos secos de Passiflora alata Dryander, da Maytenus ilicifolia Martius e da Bauhinia forficata Link, serão obtidos por spray drying e secagem em leito de jorro. (AU)

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As abelhas Apis mellifera preenchem todas as características de um bom polinizador e sua atividade é muito importante tanto na polinização de culturas agrícolas como para indústria apícola, contudo, pesticidas e herbicidas agrícolas têm causado sérios danos para esses insetos. Nas regiões urbanas elas podem se tornar um transtorno em estabelecimentos comerciais que utilizam ou vendem produtos açucarados e para pessoas que apresentam reações alérgicas ao veneno destes animais. O uso de repelentes é um importante e prático meio de proteção contra os insetos, pois são capazes de afastá-los evitando sua morte. Diversos trabalhos sobre repelentes para abelhas já foram desenvolvidos, mas a maior parte dos produtos testados são tóxicos e não convenientes para seres usados como repelentes tópicos ou em estabelecimentos comerciais. Este trabalho visa avaliar o efeito repelente, de algumas substâncias químicas, originadas a partir de extratos vegetais e outros produtos naturais que possam potencialmente serem usadas como repelentes tópicos e em estabelecimentos comerciais, contra as abelhas africanizadas. (AU)

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O efeito de antioxidantes sobre a intensidade da quimiluminescência do luminol induzida por radicais livres tem sido utilizado para monitorar níveis de reatividade e potencial antioxidante em misturas complexas como extratos vegetais ou fluidos biológicos. Diferentes índices (TRAP, TAR e ORAC) tem sido propostos para quantificar e algumas vezes qualificar antioxidantes presentes em uma amostra. A adição de antioxidantes ao sistema luminol resulta em uma modificação do perfil da curva de emissão quimiluminescente, devido ao seqüestro, pelos antioxidantes, dos radicais livres formados no sistema. Desta mudança da cinética de emissão pode-se obter informações com respeito à quantidade de antioxidante presente na amostra e a sua reatividade. Por outro lado, o estudo fitoquímico de espécies da família Piperaceae obteve como resultado substâncias cuja estrutura e funcionalidade indicam para uma possível atividade antioxidante. Em especial o componente majoritário da Photomorphe umbellata, o 4-nerolidilcatecol originou diversos estudos sobre sua aplicação enquanto agente antioxidante. Neste Projeto de Mestrado será desenvolvido um ensaio baseado na quimiluminescência do luminol para a determinação do potencial antioxidante de extratos de plantas e produtos naturais. Primeiramente será testado se um sistema experimental simplificado em relação aos encontrados na literatura leva à obtenção de índices antioxidantes viáveis para em seguida, realizar o estudo sistemático de espécies da família Piperaceae. (AU)

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O presente projeto representa um primeiro esforço no sentido de explorar funcionalmente os resultados do projeto de sequenciamento do genoma da bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli no que tange a identificação de genes de patogenicidade. Seus objetivos dividem-se em duas vertentes: análise comparativa e análise funcional propriamente dita. No caso de Lxx, a análise comparativa reveste-se de especial interesse e de grande potencial para identificar genes de patogenicidade, haja vista a existência de uma outra subespécie de Leifsonia xyli, L.x. subsp. cynodontis (Lxc), que é patogênica a gramíneas do gênero Cynodon mas que, embora endofítica, não é patogência a cana-de-açúcar. Considerando o grande número de exemplos onde fenótipos virulentos podem ser determinados pela presença ou ausência de certos genes, o presente projeto utilizará técnicas alternativas ao seqüenciamento completo de genomas para identificar genes exclusivos ao genoma de cada uma destas bactérias. A expressão destes genes será então analisada em experimentos funcionais subseqüentes, através da técnica de microarray para estudar padrões de expressão gênica de isolados selvagens patogênicos de Lxx e de mutantes não patogênicos, em células cultivadas na presença e ausência de extratos vegetais. (AU)

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